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小鱼儿822

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】做5'序列必须用RACE吗? 已有4人参与

我最在一个15kbp的基因,根据已有的序列在5端设计了兼并引物,测序结果不是很理想,5端仍有几个碱基是兼并碱基。我准备用RACE做,但是问了不少人,都说不好做;可是有个老师说如果不用RACE试剂盒写文章的时候容易遭质疑。各为虫友,我有必要用RACE做吗,或者利用设计的兼并引物多做几次?
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jasco

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-03-22 14:20:34
你用简并引物做再多次,也不能说明5'端的序列是你模板的实际序列啊,所以建议你做5'race,
5‘race方法现在很成熟,多家公司有kit的
2楼2011-03-22 09:20:39
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激情海洋

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
建议你做RACE,现在的kit很多,方法也不复杂,而且效率很高
3楼2011-03-22 13:58:21
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rioarsenal

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 小鱼儿822 at 2011-03-22 08:44:18:
我最在一个15kbp的基因,根据已有的序列在5端设计了兼并引物,测序结果不是很理想,5端仍有几个碱基是兼并碱基。我准备用RACE做,但是问了不少人,都说不好做;可是有个老师说如果不用RACE试剂盒写文章的时候容易 ...

资金充裕的话,买RACE试剂盒,记得曾经用过一个invitrogen的,非常好用;

如果想省钱,可以做锚定,不过只能做DNA
4楼2011-03-22 14:32:55
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小鱼儿822

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by rioarsenal at 2011-03-22 14:32:55:
资金充裕的话,买RACE试剂盒,记得曾经用过一个invitrogen的,非常好用;

如果想省钱,可以做锚定,不过只能做DNA

就是因为资金不是很充足,还能推荐个比invitrogen便宜的国产的试剂盒吗?
5楼2011-03-23 08:47:56
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rioarsenal

金虫 (正式写手)


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引用回帖:
Originally posted by 小鱼儿822 at 2011-03-23 08:47:56:
就是因为资金不是很充足,还能推荐个比invitrogen便宜的国产的试剂盒吗?

国内就算了,可以用宝生物的。
6楼2011-03-23 13:14:50
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