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@无花棉@

银虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】水抽提法 DNA提取

从资料中看到下面一段话：
水抽提法：利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA，然后将沉淀溶于水中，使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M.加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出.然后分别用66% ?80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得DNA样品.此法提取的DNA中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取过程中加入SDS.
请问哪位虫友用该方法提取过核酸，效果如何？上面的方法步骤是否完整？谢谢！！

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1楼2011-03-18 15:56:43

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@无花棉@

银虫 (小有名气)

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引用回帖:

Originally posted by shaquila at 2011-03-20 17:55:00:
lz，用CTAB的得率很高的，做southern的DNA我全部用这个提的，25毫升管提的，够做10次，而且纯度挺高的，如果蛋白要除得彻底可以用酚抽提，但是会损失10-30%的DNA
ls用的和CTAB差不多吧，酚氯仿加上异戊醇效果更好 ...

非常感谢！我之前一直考虑用CTAB，方案写好后，导师就让我放弃该方法，说提出来的量太少了（因为提完之后是要上小鼠的）。我觉得只有尝试一下才能知道结果。既然你也提到得率很高，我觉得很有必要自己偷着试试。。。