应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】土壤真菌PCR
52/1返回列表
查看: 2315  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

wuzunfeng416

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】土壤真菌PCR 已有6人参与

最近再批土壤真菌，没条带，望大家提提建议，用的引物是NS1F和NS8R
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2011-03-15 14:08:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hc1027

木虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by bear0329 at 2011-08-04 22:15:18:
1.加氯仿异戊醇时都要缓慢，颠倒混匀即可，13000rpm 10min
2.洗完沉淀后，13000rpm 10min，去上清
3.离心管倒扣在吸水纸上，然后可以用移液枪小心把多余残留的酒精吸掉，在无菌操作台上吹干或者打开盖子在4℃冰 ...

请问用70%乙醇洗沉淀去上清是离心后直接倒掉的，还是吸走的呢？
赞一下 回复此楼
13楼2011-08-04 22:21:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

allica

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
条带不好原因挺多的，首先检查你的基因组DNA质量。然后就是你的PCR模板量和PCR程序调整。可以做个退火温度梯度的实验。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-03-15 15:41:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

精精

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by wuzunfeng416 at 2011-03-15 14:08:23:
最近再批土壤真菌，没条带，望大家提提建议，用的引物是NS1F和NS8R

用这对引物扩真菌好像问题是挺多的，但是好像好是能够扩出来的，再尝试试试~~
赞一下(1人) 回复此楼
少才微善
3楼2011-03-17 16:49:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

syw2005

铁杆木虫 (小有名气)
我用的ITS1和ITS4，第一次能扩出来，后来再也扩不出来，不知为何？试了好多条件都不行？难，我从模板、引物、酶都摸了，还是不行。不过有一些可以定下来，模板有抑制物。多试才有经验。
赞一下 回复此楼
新疆胡杨
4楼2011-08-01 22:10:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭