应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » 【求助】使用荧光探针DCFH-DA测定细胞活性氧，为什么荧光强度随时间而增强呢？
31/1返回列表
查看: 5860  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

hjing6140

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】使用荧光探针DCFH-DA测定细胞活性氧，为什么荧光强度随时间而增强呢？

请问一下，最近使用荧光探针DCFH-DA测定细胞活性氧，为什么荧光强度随时间而增强呢？没有流式细胞仪，而是将细胞吹打开后移入比色杯中测定。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-03-14 09:35:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

酸奶一号

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
不知道楼主所测为哪种生物体细胞，此外所谓的吹打是要将细胞破碎的那种吗？一般来说荧光探针与细胞标记后可以直接测定，但需要迅速，因为细胞会随着时间不断下沉，从而影响测定结果。可以进一步交流，相互学习！
赞一下 回复此楼
2楼2014-11-18 15:24:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dida001

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
使用说明如下，20-30分钟后才可能是最强的。其次 荧光强度越强说明产生ros多啊
1. 装载探针
对于刺激时间较短(通常为2小时以内)的细胞，先装载探针，后用活性氧阳性对照或自己感兴趣的药物刺激细胞。对于细胞刺激时间较长(通常为6小时以上)的细胞，先用活性氧阳性对照或自己感兴趣的药物刺激细胞，后装载探针。
原位装载探针：本方法仅适用于贴壁培养细胞。按照1:1000用无血清培养液稀释DCFH-DA，使终浓度为10微摩尔/升。去除细胞培养液，加入适当体积稀释好的DCFH-DA。加入的体积以能充分盖住细胞为宜，通常对于六孔板的一个孔加入稀释好的DCFH-DA不少于1毫升。37℃细胞培养箱内孵育20分钟。用无血清细胞培养液洗涤细胞三次，以充分去除未进入细胞内的DCFH-DA。通常活性氧阳性对照在刺激细胞20-30分钟后可以显著提高活性氧水平.
赞一下 回复此楼
3楼2020-12-08 15:31:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 hjing6140 的主题更新
31/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭