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w.king124

金虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】一个简单的DNA变性复姓问题

做完PCR后,得到的双链DNA片段,升温至95度,然后骤冷至4度,这时候DNA肯定是单链状态,如果我再置于37度与别的东西比如蛋白质孵育一段时间,DNA双链会不会又重新回到双链呢???有没有人知道,有了解的详细地解释一下吧

[ Last edited by w.king124 on 2011-3-10 at 13:15 ]
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肯定会复性的啊~~~
3楼2011-03-10 13:46:51
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w.king124

金虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by yj-lzx at 2011-03-10 13:46:51:
肯定会复性的啊~~~

能详细得说一下吗,为什么4度时候不能复性,37°就可以?
4楼2011-03-10 14:08:17
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nmglhl

禁虫 (著名写手)

★ ★ ★
看天(金币+3): 鼓励回答 2011-03-10 15:28:47
本帖内容被屏蔽

5楼2011-03-10 14:15:14
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引用回帖:
Originally posted by w.king124 at 2011-03-10 14:08:17:
能详细得说一下吗,为什么4度时候不能复性,37°就可以?

因为37是比较合适的Tm啊~~~
7楼2011-03-10 14:22:27
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8楼2011-03-10 14:22:46
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w.king124

金虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by yj-lzx at 2011-03-10 14:22:27:
因为37是比较合适的Tm啊~~~

你有比较确切的实验证明过吗,而且我的Tm和37度不搭边吧,呵呵
9楼2011-03-10 14:44:25
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★ ★
看天(金币+2): 鼓励交流 2011-03-10 15:29:06
引用回帖:
Originally posted by w.king124 at 2011-03-10 14:44:25:
你有比较确切的实验证明过吗,而且我的Tm和37度不搭边吧,呵呵

在超过Tm的温度下迅速冷却至低温(如4℃以下),复性几乎是及不可能的~~~
10楼2011-03-10 14:58:27
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ll19841008

木虫 (正式写手)


4度复性,在做southern blot是放在-20的探针下次用的时候都要从新变性!
11楼2011-03-10 15:28:50
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简单回复
2011-03-10 13:00   回复  
zyxme6楼
2011-03-10 14:18   回复  
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