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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】一个简单的DNA变性复姓问题
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w.king124

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】一个简单的DNA变性复姓问题

做完PCR后，得到的双链DNA片段，升温至95度，然后骤冷至4度，这时候DNA肯定是单链状态，如果我再置于37度与别的东西比如蛋白质孵育一段时间，DNA双链会不会又重新回到双链呢？？？有没有人知道，有了解的详细地解释一下吧

[ Last edited by w.king124 on 2011-3-10 at 13:15 ]
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1楼2011-03-10 12:56:26
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yj-lzx

荣誉版主 (文坛精英)
肯定会复性的啊~~~
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3楼2011-03-10 13:46:51
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w.king124

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yj-lzx at 2011-03-10 13:46:51:
肯定会复性的啊~~~

能详细得说一下吗，为什么4度时候不能复性，37°就可以？
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4楼2011-03-10 14:08:17
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nmglhl

禁虫 (著名写手)
★ ★ ★
看天(金币+3): 鼓励回答 2011-03-10 15:28:47
本帖内容被屏蔽
5楼2011-03-10 14:15:14
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yj-lzx

荣誉版主 (文坛精英)
引用回帖:
Originally posted by w.king124 at 2011-03-10 14:08:17:
能详细得说一下吗，为什么4度时候不能复性，37°就可以？

因为37是比较合适的Tm啊~~~
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7楼2011-03-10 14:22:27
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yj-lzx

荣誉版主 (文坛精英)
http://baike.baidu.com/view/1017120.htm
楼主可以百度下去~~~
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8楼2011-03-10 14:22:46
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w.king124

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yj-lzx at 2011-03-10 14:22:27:
因为37是比较合适的Tm啊~~~

你有比较确切的实验证明过吗，而且我的Tm和37度不搭边吧，呵呵
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9楼2011-03-10 14:44:25
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yj-lzx

荣誉版主 (文坛精英)
★ ★
看天(金币+2): 鼓励交流 2011-03-10 15:29:06
引用回帖:
Originally posted by w.king124 at 2011-03-10 14:44:25:
你有比较确切的实验证明过吗，而且我的Tm和37度不搭边吧，呵呵

在超过Tm的温度下迅速冷却至低温(如4℃以下),复性几乎是及不可能的~~~
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10楼2011-03-10 14:58:27
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ll19841008

木虫 (正式写手)
4度复性，在做southern blot是放在-20的探针下次用的时候都要从新变性！
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11楼2011-03-10 15:28:50
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heshiqing1682楼
2011-03-10 13:00   回复  
zyxme6楼
2011-03-10 14:18   回复  
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