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【求助/交流】一个简单的DNA变性复姓问题
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w.king124
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[交流]
【求助/交流】一个简单的DNA变性复姓问题
做完PCR后,得到的双链DNA片段,升温至95度,然后骤冷至4度,这时候DNA肯定是单链状态,如果我再置于37度与别的东西比如蛋白质孵育一段时间,DNA双链会不会又重新回到双链呢???有没有人知道,有了解的详细地解释一下吧
[
Last edited by w.king124 on 2011-3-10 at 13:15
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肯定会复性的啊~~~
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2011-03-10 13:46:51
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at 2011-03-10 13:46:51:
肯定会复性的啊~~~
能详细得说一下吗,为什么4度时候不能复性,37°就可以?
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2011-03-10 14:08:17
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能详细得说一下吗,为什么4度时候不能复性,37°就可以?
因为37是比较合适的Tm啊~~~
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7楼
2011-03-10 14:22:27
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楼主可以百度下去~~~
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因为37是比较合适的Tm啊~~~
你有比较确切的实验证明过吗,而且我的Tm和37度不搭边吧,呵呵
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2011-03-10 14:44:25
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w.king124
at 2011-03-10 14:44:25:
你有比较确切的实验证明过吗,而且我的Tm和37度不搭边吧,呵呵
在超过Tm的温度下迅速冷却至低温(如4℃以下),复性几乎是及不可能的~~~
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2011-03-10 14:58:27
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4度复性,在做southern blot是放在-20的探针下次用的时候都要从新变性!
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