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feixiosng51

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助】同一个样品用两种液相色谱条件检测的结果不一致?怎么回事? 已有11人参与

同一个样品两种方法检测结果不一致
请教大家,同一个样品用两种液相色谱条件检测的结果不一致(归一化法),一个色谱条件是乙腈-0.1%磷酸=40:60,主峰保留时间为4min,杂质A 含量约0.15%。另一个是乙腈-水(0.4%HAC,0.1%TEA)=44:56,主峰为16min,采集时间足够长,完全可以检测到A,但是杂质A 没有出峰。柱子都是C18柱,牌子不一样。
另一个问题,做旋光测试时,同一份样品用两根长度不一样的旋光管,测出来结果偏差比较大,可能是什么原因?另外,同一批样品,配制两份溶液,旋光值测出来也不一样,为什么呢?
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novus

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
karl2100(金币+1): 多谢指教! 2011-03-09 20:12:17
个人认为是因为楼主所用的流动相不同导致杂质未检出。
添加无机酸磷酸的流动相本身紫外吸收比较弱,故能看到较小的杂质(0.15%),但换为添加有机酸(HAC)碱(TEA)后的流动相,本身紫外吸收增强了很多,可能会掩盖小杂质的检出,也就是说该杂质的检测限变高了,所以看不到。
别太放肆,没什么用!
8楼2011-03-09 20:03:56
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feixiosng51

铁虫 (小有名气)

补充:检测波长244nm,pH值分别为2.4,4.3
2楼2011-03-09 11:28:08
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bronzezt

至尊木虫 (职业作家)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
karl2100(金币+1): 谢谢! 2011-03-09 19:53:06
1.有可能是柱子的原因 不同柱子有些杂质是不能检测到,你可以试试两个流动相下 同一柱子是否出现这种情况,以排除是否柱子的原因。
2.  [a](t,D)=  100a/LC   
L为测定管长度,dm;
α 为测得的旋光度;
c 为每100ml溶液中含有被测物质的重量,g(按干燥品或无水物计算)可见比旋度与管长有关。
3楼2011-03-09 13:57:44
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hongqianqian

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
流动相条件不同,杂质很可能就不能被洗脱下来~
快乐多多,好运多多~
5楼2011-03-09 16:47:37
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