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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物化学 » 【求助】同一个样品用两种液相色谱条件检测的结果不一致？怎么回事？
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feixiosng51

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助】同一个样品用两种液相色谱条件检测的结果不一致？怎么回事？ 已有11人参与

同一个样品两种方法检测结果不一致
请教大家，同一个样品用两种液相色谱条件检测的结果不一致（归一化法），一个色谱条件是乙腈-0.1%磷酸=40:60，主峰保留时间为4min，杂质A 含量约0.15%。另一个是乙腈-水（0.4%HAC，0.1%TEA）=44:56，主峰为16min，采集时间足够长，完全可以检测到A，但是杂质A 没有出峰。柱子都是C18柱，牌子不一样。
另一个问题，做旋光测试时，同一份样品用两根长度不一样的旋光管，测出来结果偏差比较大，可能是什么原因？另外，同一批样品，配制两份溶液，旋光值测出来也不一样，为什么呢？
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1楼 2011-03-09 09:56:52
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小丁不识木木

新虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1): 谢谢参与讨论！ 2011-03-09 19:53:47
短一点的柱子是不是没有完全分离呢   长柱子如果完全分离了  结果可能就有很大偏差了吧
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7楼2011-03-09 17:32:42
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feixiosng51

铁虫 (小有名气)
补充：检测波长244nm，pH值分别为2.4,4.3
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2楼2011-03-09 11:28:08
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bronzezt

至尊木虫 (职业作家)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1): 谢谢！ 2011-03-09 19:53:06
1.有可能是柱子的原因 不同柱子有些杂质是不能检测到，你可以试试两个流动相下 同一柱子是否出现这种情况，以排除是否柱子的原因。
2.  [a](t,D)=  100a/LC   
L为测定管长度，dm；
α 为测得的旋光度；
c 为每100ml溶液中含有被测物质的重量，g（按干燥品或无水物计算）可见比旋度与管长有关。
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3楼2011-03-09 13:57:44
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hongqianqian

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
流动相条件不同，杂质很可能就不能被洗脱下来~
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快乐多多，好运多多~
5楼2011-03-09 16:47:37
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