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angjzy

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请问pet28a表达的蛋白一定是细胞内表达的么？

请问pet28a表达的蛋白一定是细胞内表达的么？
谢谢
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1楼 2011-03-07 19:23:43
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roomofxw

木虫 (正式写手)
★
angjzy(金币+1):谢谢参与
angjzy(金币+1): 2011-03-07 19:36:16
是啊，除非序列带有信号肽。
或者导致细胞死亡裂解的能力
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2楼2011-03-07 19:35:23
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angjzy

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by roomofxw at 2011-03-07 19:35:23:
是啊，除非序列带有信号肽。
或者导致细胞死亡裂解的能力

你好，要是表达在大肠杆菌里，不是酵母，也是细胞内表达？序列是师兄设计的
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3楼2011-03-07 19:37:30
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roomofxw

木虫 (正式写手)
E.coli也可以分泌到间质中去
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4楼2011-03-07 19:39:45
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angjzy

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by roomofxw at 2011-03-07 19:39:45:
E.coli也可以分泌到间质中去

必须细胞破碎才能得到蛋白么？
现在细胞外的蛋白浓度比较低，但是SDS和测活力都有一点
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5楼2011-03-07 19:43:55
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roomofxw

木虫 (正式写手)
有可能啊，E.coli细胞常规培养时也总有死亡，裂解的，蛋白释放到培养基里面啦。但是SDS都能看见，就少见了，总不能死掉那么多吧。
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6楼2011-03-07 19:46:45
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angjzy

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by roomofxw at 2011-03-07 19:46:45:
有可能啊，E.coli细胞常规培养时也总有死亡，裂解的，蛋白释放到培养基里面啦。但是SDS都能看见，就少见了，总不能死掉那么多吧。

不是粗的发酵液，是浓缩了100倍后的了。。。。
那我在试试破碎后在跑个SDS吧
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7楼2011-03-07 19:53:21
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angjzy

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by roomofxw at 2011-03-07 19:46:45:
有可能啊，E.coli细胞常规培养时也总有死亡，裂解的，蛋白释放到培养基里面啦。但是SDS都能看见，就少见了，总不能死掉那么多吧。

谢谢你啊
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8楼2011-03-07 19:53:33
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