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canghao2010

银虫 (初入文坛)

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[交流] 【求助】寻求TNBS法测氨基酸含量的具体操作

如题，本人想用TNBS法来测定氨基酸含量，但找不到相关的具体操作方法，哪位虫友做过或者有其具体操作步骤的，请不吝赐教，谢谢！

[ Last edited by lovibond on 2011-8-30 at 10:28 ]

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1楼 2011-03-04 09:23:16

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zhl1021

新虫 (初入文坛)

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TNBS法测氨基含量

★
canghao2010(金币+8): 谢谢 2011-03-04 15:05:20
junwen6516(金币+1): 感谢zhl回帖交流 2011-03-04 15:31:51

取0.25ml样品加入盛有2ml的磷酸缓冲液（pH8.2,0.2125mol/L）的试管中，混匀，然后加入1ml 0.01%TNBS溶液，试管于50℃水浴避光加热30min。反应完成后，加入2ml 0.1mol/L 无水亚硫酸钠终止反应，试管于室温下放置15min后，测定420nm下的吸光值，以水为空白。

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2楼2011-03-04 12:58:55

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kumaelle

新虫 (初入文坛)

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★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

引用回帖:

2楼: Originally posted by zhl1021 at 2011-03-04 12:58:55
取0.25ml样品加入盛有2ml的磷酸缓冲液（pH8.2,0.2125mol/L）的试管中，混匀，然后加入1ml 0.01%TNBS溶液，试管于50℃水浴避光加热30min。反应完成后，加入2ml 0.1mol/L 无水亚硫酸钠终止反应，试管于室温下放置15mi ...

请问一下，检测得到的标准曲线和吸光值后，怎么计算出氨基含量？公式是怎样的呢？找了一些文献，但是没有同意的公式。我主要是想检测氨基的修饰度。感谢！

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3楼2013-04-25 14:44:28

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