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黑森林

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请教,DNA浓度怎么测定 已有16人参与

弱弱问个问题

提完基因组DNA后,测定浓度

用分光光度计测得OD260=1.00
根据公式计算浓度=1.000(OD260) * 50(ug/ml) *100(稀释倍数) =5 ug/ul

然后根据凝胶电泳,测得50 ng/ul

怎么差别这么大?
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nuoyaeva

铁杆木虫 (正式写手)

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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1): 感谢分享实验经验 2011-03-02 18:18:20
一般的测定可以用NanoDrop,微量的可以用DNA Nano chip或是Pico chip。刚好最近我也在做这方面的。


[ Last edited by nuoyaeva on 2011-3-2 at 10:06 ]
生活是美好的
9楼2011-03-02 10:05:02
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1): 感谢交流 2011-03-02 18:17:04
当然是分光光度计准确了……电泳这么粗糙只是估算

另外电泳的数值你是如何估算出来的?
2楼2011-03-01 20:44:53
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黑森林

金虫 (小有名气)

电泳是根据marker 定量的

但是两种方法差别也太大了……
3楼2011-03-01 20:46:39
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yabing0324

金虫 (职业作家)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 黑森林 at 2011-03-01 19:46:34:
弱弱问个问题

提完基因组DNA后,测定浓度

用分光光度计测得OD260=1.00
根据公式计算浓度=1.000(OD260) * 50(ug/ml) *100(稀释倍数) =5 ug/ul

然后根据凝胶电泳,测得50 ng/ul

怎么差别这么大?

我们用的是核酸蛋白定量仪,打进去1.5微升,直接出浓度
4楼2011-03-01 20:47:21
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