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steven689

木虫 (著名写手)


[交流] 【求助/交流】关于酶切位点和ATG间的一个碱基的问题

现在在做表达。载体选择的是pET-21b(+),外源目的基因的扩增引物序列是:CGGGATCCgATGAGTCCAAATAA......
       其中:CGG是保护碱基;GGATCC是BamH 1的酶切位点;中间加了个g;后面是ATG。
     为什么要加个g呢?我算了算不加g刚好处在正确的三联密码子,加个反而多一个碱基,密码子就移位了。
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sutao1979

木虫 (著名写手)


★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+1): 鼓励交流 2011-02-23 09:38:40

设计引物时候多加几个碱基就ok了
4楼2011-02-22 21:39:26
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cxt86

金虫 (小有名气)


★ ★
dhd997(金币+2): 欢迎交流 2011-02-22 18:38:34
steven689(金币+1): 10 2011-02-22 18:56:46
steven689(金币+9): 2011-02-22 18:57:17

你确定不加G正好是三联密码子吗?我查了下pET-21b的图谱,貌似必须有这个G组成CCG密码子
否则就移位了
2楼2011-02-22 18:20:17
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steven689

木虫 (著名写手)



呵呵,谢谢,的却如此
3楼2011-02-22 18:58:33
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