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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于酶切位点和ATG间的一个碱基的问题
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steven689

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】关于酶切位点和ATG间的一个碱基的问题

现在在做表达。载体选择的是pET-21b(+)，外源目的基因的扩增引物序列是：CGGGATCCgATGAGTCCAAATAA......
       其中：CGG是保护碱基；GGATCC是BamH 1的酶切位点；中间加了个g；后面是ATG。
     为什么要加个g呢？我算了算不加g刚好处在正确的三联密码子，加个反而多一个碱基，密码子就移位了。
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1楼 2011-02-22 17:15:25
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sutao1979

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1): 鼓励交流 2011-02-23 09:38:40

设计引物时候多加几个碱基就ok了
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4楼2011-02-22 21:39:26
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cxt86

金虫 (小有名气)
★ ★
dhd997(金币+2): 欢迎交流 2011-02-22 18:38:34
steven689(金币+1): 10 2011-02-22 18:56:46
steven689(金币+9): 2011-02-22 18:57:17

你确定不加G正好是三联密码子吗？我查了下pET-21b的图谱，貌似必须有这个G组成CCG密码子
否则就移位了
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2楼2011-02-22 18:20:17
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steven689

木虫 (著名写手)

呵呵，谢谢，的却如此
赞一下 回复此楼
3楼2011-02-22 18:58:33
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