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【分享】怎样处理、保存离子交换填料 已有1人参与
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离子交换填料的处理和保存 离子交换填料使用前一般要进行处理。干粉状的离子交换填料首先要进行膨化，将干粉在水中充分溶胀，以使离子交换填料颗粒的孔隙增大，具有交换活性的电荷基团充分暴露出来。而后用水悬浮去除杂质和细小颗粒。再用酸碱分别浸泡，每一种试剂处理后要用水洗至中性，再用另一种试剂处理，最后再用水洗至中性，这是为了进一步去除杂质，并使离子交换填料带上需要的平衡离子。市售的离子交换填料中通常阳离子交换填料为Na 型(即平衡离子是Na 离子)，阴离子交换填料为Cl 型，因为通常这样比较稳定。处理时一般阳离子交换填料最后用碱处理，阴离子交换填料最后用酸处理。常用的酸是HCl，碱是NaOH 或再加一定的NaCl，这样处理后阳离子交换填料为Na 型，阴离子交换填料为Cl 型。使用的酸碱浓度一般小于0.5mol/L，浸泡时间一般30min。处理时应注意酸碱浓度不宜过高、处理时间不宜过长、温度不宜过高，以免离子交换填料被破坏。另外要注意的是离子交换填料使用前要排除气泡，否则会影响分离效果。 离子交换填料的再生是指对使用过的离子交换填料进行处理，使其恢复原来性状的过程。前面介绍的酸碱交替浸泡的处理方法就可以使离子交换填料再生。离子交换填料的转型是指离子交换填料由一种平衡离子转为另一种平衡离子的过程。如对阴离子交换填料用HCl 处理可将其转为Cl 型，用NaOH 处理可转为OH 型，用甲酸钠处理可转为甲酸型等等。对离子交换填料的处理、再生和转型的目的是一致的，都是为了使离子交换填料带上所需的平衡离子。 离子交换层析主要通过离子交换填料上的平衡离子与样品中的组分离子进行可逆的交换而实现分离的目的，因此在离子交换层析前要注意使离子交换填料带上合适的平衡离子，使平衡离子能与样品中的组分离子进行有效的交换。如果平衡离子与离子交换填料结合力过强，会造成组分离子难以与交换剂结合而使交换容量降低。另外还要保证平衡离子不对样品组分有明显影响。因为在分离过程中，平衡离子被置换到流动相中，它不能对样品组分有污染或破坏。如在制备过程中用到的离子交换填料的平衡离子是H 或OH 离子，因为其它离子都会对纯水有污染。但是在分离蛋白质时，一般不能使用H 或OH 型离子交换填料，因为分离过程中H 或OH 离子被置换出来都会改变层析柱内pH 值，影响分离效果，甚至引起蛋白质的变性。离子交换填料保存时应首先处理洗净蛋白等杂质，并加入适当的防腐剂，一般加入0.02 %的叠氮钠，4°C 下保存。 上述材料供参考。具体填料的处理方法，请依据其使用说明。  [ Last edited by henghuibio on 2011-2-15 at 10:37 ] |
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2楼2013-11-26 22:35:17
