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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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诺曼底1227

铁杆木虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】ALP的定量检测一些问题

小弟现在在做关于成骨化的一些实验,其中有一项是要检测hBMSC的ALP表达情况,由于我是将细胞接种到一种材料上面,所以在后期裂解细胞时一般都是将细胞消化下来,但我已经反反复复做过很多次了,都没办法把细胞消化下来,我想可能是材料表面存在一些孔洞,细胞长进这些孔洞里面了,所以想请教一下各位,有没有什么方法能直接把细胞裂解掉,而不用消化下来。
PS:ALP定量检测,我采用的方法是pNPP法,而且还需要通过BCA法检测其中的总蛋白质的量。
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jonehwa

铁虫 (正式写手)



诺曼底1227(金币+1):谢谢参与
有办法了吗?
2楼2011-10-28 15:12:17
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诺曼底1227

铁杆木虫 (正式写手)


★ ★ ★ ★
wanhscn(金币+4): Good! 鼓励交流! 鼓励反馈! 2011-11-01 08:48:52
引用回帖:
2楼: Originally posted by jonehwa at 2011-10-28 15:12:17:
有办法了吗?

用0.2%Triton x-100裂解细胞,同时把材料碾碎,反复吹打
3楼2011-10-29 09:19:33
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jonehwa

铁虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 诺曼底1227 at 2011-10-29 09:19:33:
用0.2%Triton x-100裂解细胞,同时把材料碾碎,反复吹打

你们用的是什么材料啊?我们是胶原,而且挺厚的,碾碎估计很难,还有什么好办法么?  我目前打算用triton +冻融结合,不知道效果怎么样。
4楼2011-10-31 17:27:17
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诺曼底1227

铁杆木虫 (正式写手)



wanhscn(金币+1): 鼓励交流! 2011-11-01 08:49:14
引用回帖:
4楼: Originally posted by jonehwa at 2011-10-31 17:27:17:
你们用的是什么材料啊?我们是胶原,而且挺厚的,碾碎估计很难,还有什么好办法么?  我目前打算用triton +冻融结合,不知道效果怎么样。

胶原的确不好弄,直接冻融难道不行?
5楼2011-11-01 08:11:09
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shenqushen

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
裂解时间是否有问题,要镜检看到细胞破碎了才好,也可加超声辅助,至于反复冻融是相对麻烦一点。
6楼2012-07-31 08:03:19
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饿狼

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主 ,请问0.2%TritonX-100 裂解多次时间?需要冰上进行吗
7楼2018-06-22 19:28:32
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