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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】农杆菌
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30937747

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】农杆菌

农杆菌是不是对转化进去的质粒有特别的修饰作用?

如果有，

有人知道是怎么修饰的吗?我有个质粒在大肠中提取出来可以酶切,但是从农杆菌中提出来,酶切后都很严重的拖尾.甚至看不清酶切的条带

[ Last edited by rainwander on 2011-1-26 at 22:06 ]
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1楼 2011-01-24 22:39:52
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0610616

木虫 (正式写手)
★
rainwander(金币+1): 鼓励新虫积极参与交流~~~ 2011-01-25 10:17:48
30937747(金币+1): 可能你没有明白我问的是什么.. 2011-01-25 17:20:51
是的 通过农杆菌转化植物之后，质粒也得到相应的表达
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2楼2011-01-25 08:30:57
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rioarsenal

金虫 (正式写手)
30937747(金币+1): 是肯定有.所以我想知道是怎么修饰的. 2011-01-25 17:21:11
30937747(金币+1): 2011-02-16 16:26:29
应该有，但怎么修饰的还真不知道。
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3楼2011-01-25 09:30:06
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30937747

木虫 (小有名气)

求助

有人知道是怎么修饰的吗?我有个质粒在大肠中提取出来可以酶切,但是从农杆菌中提出来,酶切后都很严重的拖尾.甚至看不清酶切的条带
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4楼2011-01-25 17:23:09
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380665135

新虫 (初入文坛)

甲基化

30937747(金币+1): 谢谢 2011-03-09 22:30:20
也许是被甲基化了.可以再转化到大肠中看看.可以去甲基化
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5楼2011-03-09 09:05:40
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walker2898

银虫 (小有名气)
30937747(金币+2): 谢谢,我现在只是需要提出来做酶切鉴定.想知道条带不清楚是什么原因.好解决这个问题 2011-03-09 22:31:20
这个问题我觉得，农杆菌的质粒不是很好提，提完后浓度很低，做酶切看不清很正常，质粒转化农杆菌需要一定的相互作用，但是我觉得对基因应该没有什么影响，转入植物后不会影响表达。
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6楼2011-03-09 09:14:31
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wuyucool

铁杆木虫 (著名写手)
30937747(金币+2): 这样做游泳吗? 2011-03-09 22:31:48
从农杆菌提质粒后直接转化大肠 一般验证农杆菌中的质粒用PCR
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7楼2011-03-09 09:18:40
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shaquila

金虫 (正式写手)
30937747(金币+1): 是我自己转进去的质粒再提出来做酶切鉴定.条带很亮但是就是一酶切就拖. 2011-03-09 22:32:27
农杆菌拷贝数低～～～～～～～～～～～
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8楼2011-03-09 10:35:26
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shaquila

金虫 (正式写手)
哦，那我倒没有呢，可以换个酶切切试试，有些酶对甲基化敏感的～～
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9楼2011-03-10 09:08:35
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walker2898

银虫 (小有名气)
那你可以多加提取的质粒，甚至不用水。也可以菌液PCR验证。
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10楼2011-03-10 17:45:12
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轩之谓的学问

金虫 (小有名气)

求短杆菌的有关资料？

菌落形态、工业应用等等。。。。。谢谢
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11楼2011-03-13 10:34:33
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