24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (3017)
>虫友互识 (233)
>文献求助 (159)
>导师招生 (63)
>休闲灌水 (47)
>考博 (43)
>招聘信息布告栏 (38)
>博后之家 (32)
>硕博家园 (22)
>晶体 (18)
>论文投稿 (18)
>论文道贺祈福 (16)
>公派出国 (13)
>考研 (12)
>教师之家 (11)
>有机资源 (10)

返回列表

jyh024

木虫 (正式写手)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 4818
帖子: 514
在线: 127小时
虫号: 1127493

[交流] 【求助/交流】异源表达的蛋白大小变大

我用的是pET-15b载体在BL21中表达的放线菌中的一个氧化还原酶，结果跑出电泳来总是发现蛋白比目的蛋白变大了，不知道怎么回事。换了载体也是这样的，而且测序显示DNA序列正确，求教各位大侠了。

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

蛋白沉淀的奇异事件已经有8人回复
静电纺丝中，六氟异丙醇做为丝素蛋白的溶解剂，溶解剂浓度是多少？已经有13人回复
化学家在牙菌斑细菌中发现最天然的异变蛋白质已经有3人回复
PDQuest分析差异蛋白过程中出现不匹配的现象已经有6人回复
【求助/交流】做真菌异源表达的表达序列是否可从基因组上扩已经有7人回复
【求助/交流】请过来人推荐用于异源表达的蛋白His-tag纯化的试剂盒已经有3人回复
【求助/交流】蛋白样品加热煮过和不煮，SDS-PAGE结果差异显著，这是为何？已经有20人回复
【求助】怎样提高蛋白质特异性吸附已经有18人回复
【求助/交流】如何降低，多克隆抗体非特异性？已经有12人回复
【求助】异硫氨酸荧光素标记纤维连接蛋白Fn方法已经有4人回复
【分享】德国研究显示绿茶成分可解蛋白质异常沉积毒性已经有3人回复

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2011-01-20 10:48:36

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

biowandy

木虫 (正式写手)

应助: 3 (幼儿园)
金币: 4752.3
帖子: 627
在线: 157.8小时
虫号: 382870

★ ★
rainwander(金币+2): 解释的很到位~~~鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-20 13:35:22
jyh024(金币+3): 感谢你的帮助！这个大小我是用软件做的。 2011-01-21 09:12:34

引用回帖:

Originally posted by jyh024 at 2011-01-20 10:48:36:
我用的是pET-15b载体在BL21中表达的放线菌中的一个氧化还原酶，结果跑出电泳来总是发现蛋白比目的蛋白变大了，不知道怎么回事。换了载体也是这样的，而且测序显示DNA序列正确，求教各位大侠了。

先看看载体是否带有什么标签，或者说起始密码子在那个位置，是否有多表达的部分，

其次你要搞清楚你的目的蛋白大小是什么意思，是别人告诉你的大小，还是说你有标准品，很多时候在数据库查的分子量和真实的蛋白分子量是有差异的，这种差异有几个原因，第一就是page本身就不是精确的方法，收到一些因素影响，第二你的蛋白是否有糖基化，有些蛋白数据库只告诉你蛋白的大小，但是糖基化的大小他不会告诉你。