应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】异源表达的蛋白大小变大
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
31/1返回列表
查看: 879  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

jyh024

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】异源表达的蛋白大小变大

我用的是pET-15b载体在BL21中表达的放线菌中的一个氧化还原酶，结果跑出电泳来总是发现蛋白比目的蛋白变大了，不知道怎么回事。换了载体也是这样的，而且测序显示DNA序列正确，求教各位大侠了。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-01-20 10:48:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biowandy

木虫 (正式写手)
★ ★
rainwander(金币+2): 解释的很到位~~~鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-20 13:35:22
jyh024(金币+3): 感谢你的帮助！这个大小我是用软件做的。 2011-01-21 09:12:34
引用回帖:
Originally posted by jyh024 at 2011-01-20 10:48:36:
我用的是pET-15b载体在BL21中表达的放线菌中的一个氧化还原酶，结果跑出电泳来总是发现蛋白比目的蛋白变大了，不知道怎么回事。换了载体也是这样的，而且测序显示DNA序列正确，求教各位大侠了。

先看看载体是否 带有什么标签，或者说起始密码子在那个位置，是否有多表达的部分，

其次你要搞清楚你的目的蛋白大小是什么意思，是别人告诉你的大小，还是说你有标准品，很多时候在数据库查的分子量和真实的蛋白分子量是有差异的，这种差异有几个原因，第一就是page本身就不是精确的方法，收到一些因素影响，第二你的蛋白是否有糖基化，有些蛋白数据库只告诉你蛋白的大小，但是糖基化的大小他不会告诉你。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-01-20 11:41:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★
amisking(金币+1): 鼓励发帖交流！ 2011-01-20 19:40:27
jyh024(金币+2): 谢谢指教！ 2011-01-21 09:11:46
如果有His-tag的话，SDS-PAGE显示分子量变大几KD是很正常的，有文章专门报道这种情况；另外蛋白的高级结构也影响SDS-PAGE上表观分子量的，至于楼上说的糖基化在大肠杆菌是不会发生的，可以排除。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-01-20 13:55:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jyh024 的主题更新
31/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 机械专硕274求调剂，不挑专业学校 +6 泛泛2333 2026-04-05 7/350 2026-04-05 23:20 by chyhaha
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358求调剂 +4 cs0106 2026-04-05 4/200 2026-04-05 22:49 by lbsjt
[考研] 材料专硕 调剂 +14 CXN123456 2026-04-03 14/700 2026-04-05 17:18 by Hdyxbekcb
[考研] 324求调剂 +9 想上学求调 2026-04-03 9/450 2026-04-04 23:57 by 果冻大王
[考研] 315求调剂 +13 小羊小羊_ 2026-04-02 14/700 2026-04-04 20:30 by 蓝云思雨
[考研] 0835学硕299求调剂 08大类可接受 +5 useryy 2026-04-03 5/250 2026-04-04 20:07 by 蓝云思雨
[考研] 342求调剂 +3 Liang7111 2026-04-04 5/250 2026-04-04 19:47 by dongzh2009
[考研] 求调剂 +3 wos666 2026-04-03 3/150 2026-04-04 05:16 by gswylq
[考研] 268求调剂 +8 你好tg 2026-04-03 9/450 2026-04-04 05:08 by gswylq
[考研] 336求调剂 +8 kiyy 2026-04-01 8/400 2026-04-03 19:41 by lijunpoly
[考研] 315求调剂 +6 顺理成张 2026-04-03 8/400 2026-04-03 14:04 by 百灵童888
[考研] 348求调剂 +11 zzzzyk123 2026-04-01 11/550 2026-04-02 16:52 by Wang200018
[考研] 求调剂 +7 Aniyaio 2026-04-02 7/350 2026-04-02 16:42 by zzsw+
[考研] 318求调剂 +3 笃行致远. 2026-03-31 4/200 2026-04-02 15:56 by Jaylen.
[考研] 314求调剂 +11 1xiaojun23 2026-03-31 12/600 2026-04-02 12:31 by 1xiaojun23
[考研] 08生物与医药专硕初试346找调剂 +6 dianeeee 2026-04-01 7/350 2026-04-02 08:23 by guoweigw
[考研] 一志愿安徽大学计算机科学与技术学硕，331分求调剂 +5 蒋昌鹏qtj 2026-04-01 5/250 2026-04-02 08:10 by fxue1114
[考研] 262求调剂 +9 励志一定发文章 2026-03-31 10/500 2026-04-01 12:22 by sunshine0013
[考研] 一志愿浙江大学工科动力工程370,数一121,专业课135，现在能去哪里 +3 080700调剂 2026-03-30 4/200 2026-03-31 12:00 by KLMY666
[考研] 一志愿大连理工大学，机械工程学硕，341 +3 西瓜田的守望者 2026-03-30 3/150 2026-03-31 11:08 by asdfzly
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭