应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】减少PCR错配
51/1返回列表
查看: 2007  |  回复: 12
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

xwsooo

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】减少PCR错配

我在做PCR时，从电泳结果看貌似有与目的产物相同大小的片段出现，但是怀疑有的是由于错配形成的，经过提高退火温度，减少循环次数后，发现原有的有些片段消失了，可见有的是由于错配引起的假阳性，那么问题是我接下去该如何做才能减小错配发生呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼2011-01-18 15:31:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)
★ ★ ★
xwsooo(金币+1):谢谢参与
rainwander(金币+2): 这2个保真酶很不错，强烈推荐~~~ 2011-01-18 21:15:08
xwsooo(金币+1): 2011-01-18 21:23:48
高保真的一般是pfu和kod，taqplus保真性很差，仅强于taq
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2011-01-18 15:41:36
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

天使托

专家顾问 (职业作家)
★
xwsooo(金币+1):谢谢参与
这个只有用高保真性的酶了,比如 Taqplus！
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-01-18 15:36:38
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

skkyy88888

铜虫 (著名写手)
★
xwsooo(金币+1):谢谢参与
消失的片段也可能是你要的片段啊。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-01-18 16:34:00
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

翱宇

禁虫 (正式写手)
★ ★ ★
xwsooo(金币+1):谢谢参与
rainwander(金币+2): KOD的保真性很好，但是比较贵啊·~~ 2011-01-18 21:14:50
我习惯于用Kod-plus保真性很好，基本上没有错误的。但是有一点需要注意，你的PCR的引物有可能会错，合成的碱基数越多，越容易错。建议测序正确后，进行酶切和链接，而不要通过PCR进行亚克隆！
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2011-01-18 18:43:47
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复(可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭