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【求助】请教，DPPH 已有4人参与
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请教一般做DPPH清除自由基，对照的VC需要几个梯度浓度，每个浓度具体是多少？谢谢 [ Last edited by lovibond on 2011-10-2 at 18:30 ] |
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junwen6516
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称取DPPH粉末0.0079g，用无水乙醇溶解DPPH粉末，并定容至100 mL，配制成最终浓度为20 µmol/L的DPPH乙醇溶液，放置于棕色瓶中，并保存在暗处备用。将样品稀释适当倍数，使样品进行分析时其吸光值最好在0.7以下为准。首先，取1 mL DPPH乙醇溶液与2 mL已稀释适当倍数的样品溶液在具塞试管中混合，混合后及时放置暗处，室温进行反应，反应进行30 min后，取混合液倒入玻璃比色皿中，测定其在517nm处的吸光值，同时利用无水乙醇进行空白试验，平行试验三次。为了方便考察样品对DPPH自由基清除的能力，使用Trolox作为标准物进行对照，制作Trolox标准曲线，计算样品的Trolox当量。 采用系列Trolox溶液（0 µmol/L、4 µmol/L、8 µmol/L、12 µmol/L、16 µmol/L和20 µmol/L）代替样品溶液，采用与样品溶液相同步骤，分别测定不同浓度的Trolox反应后在测定后517nm处的吸光值，根据其浓度与所得的吸光值的关系绘制标准曲线，用于计算样品的半抑制率IC50即自由基清除率为50%时所需的样品浓度。DPPH自由基清除率的计算公式如下： 式中，A517空白为空白样在517 nm处的吸光值，A517样品为待测样在517 nm处的吸光值。 |
3楼2011-01-18 20:55:07
红景天水
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