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liudaying

新虫 (初入文坛)

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[求助] 请教各位做过清除自由基实验的大神已有1人参与

我的样品是用60%乙醇提取液，采用的清除自由基的方法是邻苯三酚法清除超氧阴离子自由基，脱氧核糖法清除羟自由基，硫氰酸铁法抗亚油酸氧化实验三种。
我有两个疑问：
1、为什么我的60%乙醇提取液加入到几种方法的缓冲溶液（pH7.0磷酸钠盐缓冲液，pH8.2的Tris-HCI缓冲液）中会出现乳状浑浊？出现这种情况应该怎么处理，离心吗？
2、对于我的样品而言，是应该用60%乙醇溶液作为空白对照，还是用蒸馏水或者缓冲液就可以呢？为什么我用60%乙醇溶液作为空白对照，发现跟加入缓冲溶液相比，乙醇溶液也有一定的清除自由基能力呢？这种现象正常吗

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1楼 2014-08-31 09:55:32

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小毛孩24

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【答案】应助回帖

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liudaying: 金币+30, ★★★★★最佳答案 2014-08-31 15:08:21
dachun263031: 食品EPI+1, 辛苦 2014-08-31 20:16:45

1、浑浊可能是无机盐在乙醇溶液中溶解度比较低，有析出，建议降低乙醇提取液的量（用水稀释），还可以把缓冲液的浓度调低一点。
2、空白对照应该用相同浓度的乙醇。乙醇有羟基，体外实验中有自由基清除活性也不奇怪。还是建议用水稀释样品溶液，或者旋干用水复溶。

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