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【求助/交流】PCR怎么都p不出来东西
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manman424
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1楼
2011-01-15 14:57:18
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DH5a
银虫
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专业: 生物大分子结构与功能
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小木虫(金币
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最爱花诗雨(金币+2):鼓励交流~~ 2011-01-15 15:22:26
第一,你的模板质量怎么样,模板不好也可能扩增不出来。第二,目的基因是不是GC含量太高,若太高则要换GCbuffer来扩。第三,再考虑引物质量的问题。
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2楼
2011-01-15 15:03:21
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fungixx
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专业: 抗肿瘤药物药理
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小木虫(金币
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最爱花诗雨(金币+2):欢迎交流,可以考虑改变退火温度 2011-01-15 15:24:32
1.引物设计的不好,温度太低也不好,容易形成二聚体 你的退火温度太低了吧
2.重新合成引物再做做吧
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几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
3楼
2011-01-15 15:18:29
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green1223
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注册: 2009-04-05
专业: 植物营养学
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建议你把退火温度为 55° 或者50°试试啊 太低了!
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4楼
2011-01-15 15:27:10
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haitian0625
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专业: 基因表达调控与表观遗传学
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小木虫(金币
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退火温度太低,没有特异性,所以P不出来了。
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5楼
2011-01-15 15:54:09
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德克士27
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专业: 生物化学
升高一下退火温度!
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我用我有限的青春等你的回心转意!
6楼
2011-01-15 18:59:29
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sai00fuji
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专业: 生物化学
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小木虫(金币
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我给你的建议是:去别的实验室要点premix或者taq酶。你们实验室的酶可能失活了。
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7楼
2011-01-15 21:57:33
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