应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】重叠PCR问题
31/1返回列表
查看: 1849  |  回复: 12
查看全部回帖 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

shourjruo

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】重叠PCR问题

将500bp的片段与4000bp的片段进行连接的重叠PCR实验。中间引物设计没有问题，单独两片段PCR没有问题，并使用高保真不加A的taq酶，然后将两片段混合后在不加引物的情况下（其他按正常PCR体系添加）进行10轮PCR（40度退火），取这次PCR样品为模板进行正常PCR扩增，但总是得不到目的片段。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-01-13 09:34:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

魑魅-魍魉

新虫 (正式写手)
shourjruo(金币+1): 2011-01-15 13:40:39
shourjruo(金币+1): 2011-04-26 11:02:28
重叠区40BP你四十退火？ 温度低了吧
赞一下 回复此楼
7楼2011-01-15 12:10:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

魑魅-魍魉

新虫 (正式写手)
shourjruo(金币+1): 2011-01-16 10:10:37
shourjruo(金币+1): 2011-04-26 11:02:38
引用回帖:
Originally posted by shourjruo at 2011-01-15 13:41:18:


50度也试过的。

我当时有23个重叠，58退火，你再试试，少弄几个循环，太多循环也不容易出来
赞一下 回复此楼
10楼2011-01-15 18:31:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 shourjruo 的主题更新
31/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭