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【求助/交流】硫酸铵沉淀蛋白
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kong10
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[交流]
【求助/交流】硫酸铵沉淀蛋白
已有9人参与
提取酶时,采用硫酸铵沉淀,然后离心,但买看到蛋白,请问是哪里出现问题,离心速度一般要多大,还有整个沉淀操作过程中需要注意什么,样品量少,缓冲液也就几ml,非常感谢!
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1楼
2011-01-12 22:58:32
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simiao8793
银虫
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小木虫(金币
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):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+2):谢谢交流 2011-01-15 10:24:28
我之前做过硫酸铵分级沉淀蛋白,也是80%,在4℃过夜沉淀,离心转速10000rpm,5min,效果很好
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独孤圣仙!
9楼
2011-01-14 12:36:19
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brightfuture01
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专业: 神经生物学
加了多少硫酸铵呢?
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼
2011-01-12 23:54:41
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kong10
新虫
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专业: 生物化学
引用回帖:
Originally posted by
brightfuture01
at 2011-01-12 23:54:41:
加了多少硫酸铵呢?
80%饱和度,我从叶片提取,叶绿素含量太大,都不知道蛋白在哪,溶液不会变澄清吗?就是上清
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3楼
2011-01-13 18:08:37
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chaoen
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注册: 2006-06-04
专业: 微生物生理与生物化学
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小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):欢迎参与讨论~~~ 2011-01-13 20:12:08
最近我也在做硫酸铵沉淀,大家一起讨论讨论
当加到80%的SAS应该很容易看到有悬浮物了吧,是不是可以直接视觉角度可以判断的啊?
如果是测定蛋白觉得没有的话,说明蛋白检测方法和叶绿素有干扰吧
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4楼
2011-01-13 19:44:17
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