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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】以前能p出来，现在p不出来，求助哇
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沐七七

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】以前能p出来，现在p不出来，求助哇 已有9人参与

所有的体系都一样，酶、引物、退火温度、质粒都是一样的，以前PCR能够P出来，条带很特异很亮，但现在我死活P不出来，各种体系都试过了。马上就要年终汇报了 ，焦虑哇，希望大家帮帮忙给给意见，谢谢大家，祝实验顺利
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1楼 2011-01-05 11:13:49
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feng__

金虫 (著名写手)

雾~蝶
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
最近我也遇到这种情况了
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会不会偶尔也会想起我....
2楼2011-01-05 11:20:13
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jerry110

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这种情况经常有的，有时候要靠运气的，慢慢来就行了
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3楼2011-01-05 11:34:36
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fykxy_206

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+2):谢谢交流 2011-01-05 12:26:41
silicare(金币+1):谢谢参与 2011-01-05 12:32:02
实验有时候就是这样的。前些日子和现在要是所有的条件都一样的话，可以考虑大环境的变化，气温等等。还有就是这细微的变化导致的失败。PCR有时候很抗造，有时候空气中的一点点酶或东西就能将你的实验搞失败。不过没有关系，先静静心，放一段时间，成功也许就来了。实验顺利！
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4楼2011-01-05 11:49:14
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孤枫

金虫 (小有名气)
会不会是质粒降解了呢
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5楼2011-01-05 11:49:31
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+2):谢谢交流 2011-01-05 12:26:54
呵呵，正常，你可以尝试改变一下体系或者体系中物质的添加量，各个步骤仔细操作一遍！

我原来p了三个月都没有p出来，当时都快疯了，后来实验室买了一台新的pcr仪，做了一次就直接出来了，很亮！

实验这东西就这样！不断思索，不断克服困难，才能前进，不是吗？所以，加油！
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
6楼2011-01-05 12:02:55
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pxhcooh

金虫 (正式写手)
引物问题？仪器问题？
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7楼2011-01-05 12:50:42
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)

优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
PCR的时候，会遇上各种神奇的事情，

真是磨练人的意志啊
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千万不要因为走的太久，而忘记了我们为什么出发~~~~~~ForDream~~~~~~
8楼2011-01-05 14:00:23
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木马王子

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
对，我也遇到这种情况，可能不是你P的原因，是不是材料试剂的问题？
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9楼2011-01-05 15:35:38
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513279618

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我也遇上这种情况了，但是质粒降解的可能性很小，重新设计引物或者重新合成一批引物，可能会成功。我的就是这么干的。
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10楼2011-01-05 15:40:43
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