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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 【求助/交流】构建差减文库起始用总RNA还是mRNA好
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钟心碧

金虫 (小有名气)

心碧

[交流] 【求助/交流】构建差减文库起始用总RNA还是mRNA好 已有5人参与

各位大侠，我正在构建差减文库，请教一个问题，我反转是用clontech smart的盒子，用总RNA开始反转或者分离mRNA开始反转，我想问这两种方式，对后面的结果会有什么样的影响（ps：好不容易提的RNA降解了，就不想分离mRNA了，我提够分离用的RNA需要一个星期，两天时间提的RNA就降解了。）

[ Last edited by 钟心碧 on 2010-12-31 at 20:45 ]
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灵魂是否存在
1楼 2010-12-31 20:39:05
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ben1147

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+2):谢谢交流 2011-01-01 11:04:58
如果你确定你感兴趣的是编码基因的话，论效果当然是poly(A)+ RNA好了，当然，鉴于要分离，用总RNA还是mRNA就只能自己决定了
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2楼2011-01-01 10:32:22
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香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2011-01-04 18:32:13
当然是poly(A)+ RNA好了
RNA操作一定要小心啊，两天就降解了说明你这里的操作还是有问题的
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漫洒英雄泪，相离处士家。谢慈悲剃度在莲台下。没缘法转眼分离乍。赤条条来去无牵挂。那里讨烟蓑雨笠卷单行？一任俺芒鞋破钵随缘化！
3楼2011-01-01 16:03:33
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钟心碧

金虫 (小有名气)

心碧
引用回帖:
Originally posted by 钟心碧 at 2010-12-31 20:39:05:
各位大侠，我正在构建差减文库，请教一个问题，我反转是用clontech smart的盒子，用总RNA开始反转或者分离mRNA开始反转，我想问这两种方式，对后面的结果会有什么样的影响（ps：好不容易提的RNA降解了，就不想分离 ...

那么起始材料的不同，大概会对建库的结果造成多大的影响呢？
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灵魂是否存在
4楼2011-01-04 16:22:08
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阿德54007

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我实验室师姐都是先提取总RNA，然后再分离mRNA
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阳光温热，岁月静好，你还没来，我怎敢老
5楼2011-01-04 22:40:03
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redlizi

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
总RNA的话后面你需要PCR扩增，肯定会丢到一些信息
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6楼2011-01-05 15:21:30
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