应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】急！克隆快做了一个月了，就是做不出来
252/3返回列表上一页123下一页
查看: 2775  |  回复: 24
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

xuexue1204

铜虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):鼓励交流 2010-12-30 09:03:51
PMD-18T的连接效率是很高的，基本都能连上，有可能的你的连接体系不合适，那样也不会长的
赞一下(2人) 回复此楼
共同学习，共同进步，共同提高，加油！
11楼2010-12-29 21:06:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

犹寒

铁虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):鼓励交流 2010-12-30 09:03:59
你的PCR产物是用什么纯化的，是割胶回收还是直接用什么？
赞一下(2人) 回复此楼
12楼2010-12-29 21:45:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Arrennew

铁杆木虫 (正式写手)
用别人的平板试试
赞一下 回复此楼
生命不息，探索不止。
13楼2010-12-29 22:20:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小晓

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+2):鼓励积极参与~~~ 2011-01-01 00:57:45
你用什么酶做的PCR?确定末端有A吧？
主要就三个点关键：
1.感受态的效率，这个可以转个质粒看看，计算下效率有多高；
2.载体和片段质量，载体不要反复冻融，要不然末端被破坏了，保证载体浓度；回收的片段检测下浓度，片段浓度低于100ng/ul 肯定不大好
3.载体和片段连接比例，这个参考手册上的吧 一般是片段高点效果好
赞一下(2人) 回复此楼
做最好的自己
14楼2010-12-30 12:37:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
楼主所说的阳性对照，是不是转化质粒的？
赞一下(1人) 回复此楼
15楼2010-12-30 13:07:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hfkset

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
克隆很简单的，不要有压力，相信自己
赞一下(1人) 回复此楼
16楼2010-12-30 13:12:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nutplay

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by gongeleven at 2010-12-30 13:07:01:
楼主所说的阳性对照，是不是转化质粒的？

嗯，是质粒来的
回复此楼
17楼2010-12-30 14:16:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nutplay

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 犹寒 at 2010-12-29 21:45:32:
你的PCR产物是用什么纯化的，是割胶回收还是直接用什么？

割胶回收试剂盒纯化
赞一下 回复此楼
18楼2010-12-30 14:17:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nutplay

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 小晓 at 2010-12-30 12:37:32:
你用什么酶做的PCR?确定末端有A吧？
主要就三个点关键：
1.感受态的效率，这个可以转个质粒看看，计算下效率有多高；
2.载体和片段质量，载体不要反复冻融，要不然末端被破坏了，保证载体浓度；回收的片段检测 ...

用taq酶~载体都是在冰上融的，而且换过新的，用了没几次
赞一下 回复此楼
19楼2010-12-30 14:19:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoee2728

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我觉得可能是试剂盒的问题，换一个新的试试，有时候就是这种最不可能是问题的环节成为问题。
赞一下(1人) 回复此楼
似水流年
20楼2010-12-30 22:14:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 nutplay 的主题更新
252/3返回列表上一页123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 283求调剂 +6 那个噜子 2026-04-09 6/300 2026-04-09 16:37 by xiongjxlg
[考研] 一志愿华东师范生物学326分，求调剂 +3 刘墨墨 2026-04-09 3/150 2026-04-09 16:20 by zhuimr
[考研] 086003调剂求助 +15 苏弋万 2026-04-09 16/800 2026-04-09 16:19 by zhuimr
[硕博家园] 新一代电子信息294求调剂 不挑学校 +5 Ytyt11 2026-04-09 6/300 2026-04-09 14:40 by Ytyt11
[考研] 0854调剂 +8 长弓傲 2026-04-09 9/450 2026-04-09 14:37 by zhyzzh
[考研] 086004 求调剂 309 +7 Yin DY 2026-04-08 7/350 2026-04-09 13:59 by Delta2012
[考研] 材料调剂 +9 18815505510 2026-04-09 10/500 2026-04-09 11:46 by Sammy2
[考博] 博士自荐 +3 可可小胖 2026-04-08 3/150 2026-04-09 11:25 by juanzi_88
[考研] 一志愿华南师范大学0702物理学305调剂 +4 念常安 2026-04-07 6/300 2026-04-08 22:53 by bljnqdcc
[考研] 生物学328分求调剂 +9 闪电kkl 2026-04-08 10/500 2026-04-08 21:42 by liuhuiying09
[考研] 325分化学调剂 +9 15771691647 2026-04-02 9/450 2026-04-08 19:21 by ruoyu867
[考研] 一志愿吉大化学327求调剂 +12 王王白石 2026-04-06 13/650 2026-04-08 16:05 by luoyongfeng
[考研] 求调剂 +28 111623 2026-04-04 33/1650 2026-04-08 09:24 by 泽润东方
[考研] 080500求调剂 +12 黄宇博 2026-04-06 12/600 2026-04-07 12:41 by upczlm1989
[考研] 319分085702安全工程求调剂 +6 rious 2026-04-05 6/300 2026-04-07 09:42 by jp9609
[考研] 327求调剂 +4 拾光任染 2026-04-05 4/200 2026-04-05 20:16 by 南航~万老师
[考研] 调剂 +4 是可乐不是可乐 2026-04-04 4/200 2026-04-04 19:41 by 唐沐儿
[考研] 本科211，专业085404，293分请求调剂 +5 莲菜就是藕吧 2026-04-04 5/250 2026-04-04 14:08 by 这是一个无聊的�
[考研] 考研调剂 +3 15615482637 2026-04-03 3/150 2026-04-03 22:50 by ms629
[考研] 295求调剂 +7 愿旅途永远坦然 2026-04-02 7/350 2026-04-03 08:22 by fangshan711
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭