应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】急！克隆快做了一个月了，就是做不出来
252/3返回列表上一页123下一页
查看: 3229  |  回复: 24
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

xuexue1204

铜虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):鼓励交流 2010-12-30 09:03:51
PMD-18T的连接效率是很高的，基本都能连上，有可能的你的连接体系不合适，那样也不会长的
赞一下(2人) 回复此楼
共同学习，共同进步，共同提高，加油！
11楼2010-12-29 21:06:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

犹寒

铁虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):鼓励交流 2010-12-30 09:03:59
你的PCR产物是用什么纯化的，是割胶回收还是直接用什么？
赞一下(2人) 回复此楼
12楼2010-12-29 21:45:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Arrennew

铁杆木虫 (正式写手)
用别人的平板试试
赞一下 回复此楼
生命不息，探索不止。
13楼2010-12-29 22:20:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小晓

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+2):鼓励积极参与~~~ 2011-01-01 00:57:45
你用什么酶做的PCR?确定末端有A吧？
主要就三个点关键：
1.感受态的效率，这个可以转个质粒看看，计算下效率有多高；
2.载体和片段质量，载体不要反复冻融，要不然末端被破坏了，保证载体浓度；回收的片段检测下浓度，片段浓度低于100ng/ul 肯定不大好
3.载体和片段连接比例，这个参考手册上的吧 一般是片段高点效果好
赞一下(2人) 回复此楼
做最好的自己
14楼2010-12-30 12:37:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
楼主所说的阳性对照，是不是转化质粒的？
赞一下(1人) 回复此楼
15楼2010-12-30 13:07:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hfkset

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
克隆很简单的，不要有压力，相信自己
赞一下(1人) 回复此楼
16楼2010-12-30 13:12:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nutplay

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by gongeleven at 2010-12-30 13:07:01:
楼主所说的阳性对照，是不是转化质粒的？

嗯，是质粒来的
回复此楼
17楼2010-12-30 14:16:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nutplay

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 犹寒 at 2010-12-29 21:45:32:
你的PCR产物是用什么纯化的，是割胶回收还是直接用什么？

割胶回收试剂盒纯化
赞一下 回复此楼
18楼2010-12-30 14:17:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nutplay

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 小晓 at 2010-12-30 12:37:32:
你用什么酶做的PCR?确定末端有A吧？
主要就三个点关键：
1.感受态的效率，这个可以转个质粒看看，计算下效率有多高；
2.载体和片段质量，载体不要反复冻融，要不然末端被破坏了，保证载体浓度；回收的片段检测 ...

用taq酶~载体都是在冰上融的，而且换过新的，用了没几次
赞一下 回复此楼
19楼2010-12-30 14:19:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoee2728

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我觉得可能是试剂盒的问题，换一个新的试试，有时候就是这种最不可能是问题的环节成为问题。
赞一下(1人) 回复此楼
似水流年
20楼2010-12-30 22:14:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 nutplay 的主题更新
252/3返回列表上一页123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 上海工程技术大学 激光智能制造课题组 2027级博士研究生招生 +5 oxidpl 2026-09-20 7/350 2026-09-27 10:43 by Equinoxhua
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ViqFlLSxHDGt 2026-09-26 3/150 2026-09-27 10:42 by 4IW0sJvtEqX8
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 ViqFlLSxHDGt 2026-09-26 3/150 2026-09-27 10:26 by 4IW0sJvtEqX8
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 ViqFlLSxHDGt 2026-09-26 3/150 2026-09-27 10:21 by 4IW0sJvtEqX8
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 ViqFlLSxHDGt 2026-09-26 3/150 2026-09-27 10:15 by 4IW0sJvtEqX8
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ViqFlLSxHDGt 2026-09-26 3/150 2026-09-27 10:03 by 4IW0sJvtEqX8
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 GxESXJmptOtQ 2026-09-25 4/200 2026-09-27 06:44 by XgCC8uTcwILl
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 GxESXJmptOtQ 2026-09-25 4/200 2026-09-27 06:42 by XgCC8uTcwILl
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 GxESXJmptOtQ 2026-09-25 4/200 2026-09-27 06:39 by XgCC8uTcwILl
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 GxESXJmptOtQ 2026-09-25 3/150 2026-09-27 06:32 by XgCC8uTcwILl
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 3/150 2026-09-27 06:08 by XgCC8uTcwILl
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 3/150 2026-09-27 06:05 by XgCC8uTcwILl
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 3/150 2026-09-27 05:56 by XgCC8uTcwILl
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 4/200 2026-09-27 05:56 by XgCC8uTcwILl
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 5/250 2026-09-27 05:53 by XgCC8uTcwILl
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 4/200 2026-09-27 05:50 by XgCC8uTcwILl
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 4/200 2026-09-27 05:44 by XgCC8uTcwILl
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 3/150 2026-09-27 05:44 by XgCC8uTcwILl
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 6/300 2026-09-27 05:42 by XgCC8uTcwILl
[基金申请] 师弟论文见刊大半年才想起来申请专利，还能抢救一下吗？ +4 13108017953 2026-09-21 4/200 2026-09-24 10:06 by kudofaye
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭