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nutplay

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】急!克隆快做了一个月了,就是做不出来已有20人参与

TA 克隆
载体:pMD 18-T(Takara)
感受态:DH5a (天根)
实验流程是基本按照分子克隆上说的
PCR产物做了纯化,由于浓度比较低,所以
载体:0.5ul
PCR产物:4.5ul
Solution I: 5ul
14-16°连接过夜
转化用100ul的感受态细胞
热激什么的都没有问题,复苏后浓缩成100ul全部涂板,但是就是不长东西。做了阳性对照,也没长。好奇怪啊,不知道是哪里出了问题。
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犹寒

铁虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):鼓励交流 2010-12-30 09:03:59
你的PCR产物是用什么纯化的,是割胶回收还是直接用什么?
12楼2010-12-29 21:45:32
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