应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】有关蛋白
51/1返回列表
查看: 913  |  回复: 12
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

janet0313

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】有关蛋白

为什么我做的蛋白在浓缩过程中会出现沉淀，怎样防止沉淀的生成？
我做的蛋白还要做其他实验，是不是要PH值在蛋白等电点以外就可以防止沉淀生成？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼2010-12-28 10:57:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

janet0313

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2010-12-28 17:38:55:



。。。。。。起码也加一点盐吧，离子强度也太低了点，少说也加个50mM的NaCl啊。我建议你在Tris或者HEPES里加 100mMNaCl，这样来纯化你的蛋白。

另外要用软件预测一下你的蛋白的等电点，然后再选pH。

...

浓缩用的是 Amicon ultrafilitration cell equipped with a YM-10 cellulose membrane
赞一下 回复此楼
9楼2010-12-29 13:31:58
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
janet0313(金币+1): 2010-12-28 17:09:17
janet0313(金币+1): 2010-12-28 17:13:34
将你的蛋白质的等电点，分子量大小及缓冲液组成成分列出来看看。
赞一下 回复此楼
2楼2010-12-28 11:13:51
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

laoshu16

银虫 (小有名气)
janet0313(金币+1): 2010-12-28 17:09:22
引用回帖:
Originally posted by janet0313 at 2010-12-28 10:57:53:
为什么我做的蛋白在浓缩过程中会出现沉淀，怎样防止沉淀的生成？
我做的蛋白还要做其他实验，是不是要PH值在蛋白等电点以外就可以防止沉淀生成？

高浓度的蛋白本来就很容易沉淀出来了吧
赞一下 回复此楼
3楼2010-12-28 11:45:56
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

janet0313

银虫 (小有名气)
等电点怎么测啊，我还不太清楚？
蛋白分子量25KDa，用的缓冲溶液时HEPES
该怎么办啊？
赞一下 回复此楼
4楼2010-12-28 17:11:12
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复(可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭