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janet0313

银虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】有关蛋白

为什么我做的蛋白在浓缩过程中会出现沉淀，怎样防止沉淀的生成？
我做的蛋白还要做其他实验，是不是要PH值在蛋白等电点以外就可以防止沉淀生成？

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1楼 2010-12-28 10:57:53

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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

janet0313(金币+1): 2010-12-29 13:28:18

引用回帖:

Originally posted by janet0313 at 2010-12-28 17:13:21:

等电点怎么测啊？分子量25KDa 缓冲溶液是Tris，或HEPES

。。。。。。起码也加一点盐吧，离子强度也太低了点，少说也加个50mM的NaCl啊。我建议你在Tris或者HEPES里加 100mMNaCl，这样来纯化你的蛋白。

另外要用软件预测一下你的蛋白的等电点，然后再选pH。

你用什么方法浓缩的呢？超滤？

[ Last edited by brightfuture01 on 2010-12-28 at 17:40 ]