24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

emmayun

金虫 (正式写手)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 1015.5
帖子: 535
在线: 161小时
虫号: 282637

[交流] 【求助】提取植物叶中的蛋白怎样做呀

我想提一个植物的叶中的蛋白，怎么做呀？
谁知到提供个方法呀。

[ Last edited by lovibond on 2011-11-25 at 13:37 ]

回复此楼

» 猜你喜欢

【实验干货】生物超薄切片+HRTEM：线粒体嵴原子像一步到位已经有0人回复
食品专业论文投稿请教已经有0人回复
食品科学论文润色/翻译怎么收费? 已经有259人回复
分享食品专业书籍《Fundamentals of Food Process Engineering》，以学习目的为主。已经有2人回复
Biomass Conversion and Biorefinery 已经有2人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

新人求助，请问新鲜植物样品，先要保存一段时间，再提蛋白质，应该如何保存？已经有5人回复
植物蛋白透析提纯，没有透析袋已经有5人回复
请问有没有可以帮忙提取植物蛋白的公司？已经有5人回复
可以用植物叶片的表皮做超微结构吗已经有3人回复
快速获得植物叶表皮已经有4人回复
关于昆虫蛋白质提取的问题已经有29人回复
想请教一下做植物蛋白的免疫共沉淀需要特别注意什么吗？已经有6人回复
植物中的总蛋白与可溶性蛋白已经有3人回复
植物蛋白提取温度一般为多少已经有3人回复
请教提取拟南芥叶片总蛋白SDS-PAGE时较亮的条带对应的蛋白？已经有29人回复
提取植物叶片中蛋白质的方法，希望能有详细的参考步骤已经有8人回复
植物类caspase（细胞凋亡蛋白酶）的提取与检测已经有4人回复
急啊，求助提取RNA前，植物叶片采集的问题已经有20人回复
请问大家，提取DNA时液氮研磨组织或植物叶片的作用是什么？已经有10人回复
求适合western bloting的提取植物组织蛋白提取方法已经有12人回复
关于植物总蛋白质的溶液的浓缩已经有8人回复
【资料】植物总蛋白提取方法已经有80人回复
植物干叶片的蛋白提取已经有3人回复
怎样从植物或者食物中提取多肽，而不是蛋白质已经有14人回复
提出来的植物蛋白怎么有点发黑啊，是什么原因呢已经有6人回复
【求助】植物蛋白质提取纯化方法已经有12人回复
【求助/交流】植物蛋白提取方法讨论已经有14人回复

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2010-12-27 11:32:21

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

zhuxingjie

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 808.4
帖子: 278
在线: 46.5小时
虫号: 512431

★
lovibond(金币+1):鼓励交流 2010-12-28 09:33:41
emmayun(金币+1):20 2010-12-28 15:51:04

三氯醋酸—丙酮沉淀法
1、在液氮中研磨叶片
2、加入样品体积3倍的提取液在-20℃的条件下过夜，然后离心（4℃8000rpm以上1小时）弃上清。
3、加入等体积的冰浴丙酮（含0.07%的β-巯基乙醇），摇匀后离心（4℃8000rpm以上1小时），然后真空干燥沉淀，备用。
4、上样前加入裂解液，室温放置30分钟，使蛋白充分溶于裂解液中，然后离心（15℃8000rpm以上1小时或更长时间以没有沉淀为标准），可临时保存在4℃待用。
5、用Brandford法定量蛋白，然后可分装放入-80℃备用。
药品：
提取液：含10%TCA和0.07%的β-巯基乙醇的丙酮
裂解液：2.7g尿素0.2gCHAPS溶于3ml灭菌的去离子水中（终体积为5ml），使用前再加入1M的DTT65ul/ml。
这种方法针对双向电泳，杂质少，离子浓度小的特点！当然单向电泳也同样适用，只是电泳的条带会减少！