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niwopengyou

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】caco-2细胞transwell单层模型的电阻及空泡化问题 已有2人参与

有几个问题想向各位前辈请教:
       我现在刚开始养caco-2细胞,打算做transwell实验,养了21天,用HBSS洗完后测定电阻是200多,普萘洛尔的papp是10-5,正常,阿替洛尔的papp也是10-5,这就不正常了,说明细胞单层不致密。我想问下有哪些原因可能导致细胞长的不致密呢?
附注:1.铺板的密度是20万/ml;2.在transwell小池里看不到细胞形态,用的是聚碳酸酯膜;3.还有一个现象,细胞在平时培养的过程中,容易出现空泡现象;4.培养基是用的DMEM,ATCC上都是用MEM,是不是培养基的问题?5.一般换液都是将培养基放置室温平衡,主要是怕温度对FBS的影响;6.我想问下这个Hank’s液对细胞有影响没?为什么用hank's洗完细胞以后,电阻值就下降几乎一半呢?
望各位前辈赐教!谢谢!
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sumkki30

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
建议在换Hanks液之前用无血清培养基过渡一夜,让细胞有适应的过程,电阻值下降就没那么明显。希望有帮助
2楼2011-03-02 16:31:00
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慈小燕

铜虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
karl2100(金币+1): 谢谢参与讨论! 2011-10-20 19:32:03
caco-2细胞出现点空泡也正常,只要不是太多。我试验也曾出现过相关问题,问协和细胞库老师,他们说是细胞增长过快,可适当降低一下血清浓度。
3楼2011-10-20 15:23:38
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