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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】如何获得Lac-Z基因？
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yzxmichell

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】如何获得Lac-Z基因？

大家好，初涉分子生物学技术，想请教一下，如何获得Lac-Z基因呢？只知道Lac-Z基因是作为报告基因被人工插入到载体里的，但是想或得一段该基因，该以什么为模板来P呢？是以M13为模板吗？谢谢大家！
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1楼 2010-12-24 10:11:27
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yzxmichell

金虫 (正式写手)
还想问一下，既然有些质粒里有人工插入的Lac-Z基因，那可不可以我用该基因的引物来P Puc18/19质粒来获得Lac-Z基因呢？在线等，感谢大家！
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2楼2010-12-24 10:33:49
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
yzxmichell(金币+1):谢谢 2010-12-24 11:12:47
很多商业化的质粒里面就有这个基因，直接设计引物PCR就能得到的。
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3楼2010-12-24 11:11:41
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yzxmichell

金虫 (正式写手)
谢谢楼上的，可是我找了几个载体都不行啊，T载体里面的Lac-Z基因都只有100多bp，我需要的是500bp左右的呢，有知道的，麻烦告诉我啊，谢谢啊！！
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4楼2010-12-24 15:02:14
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★
yzxmichell(金币+1):谢谢 2010-12-24 15:42:55
dhd997(金币+1):谢谢交流 2010-12-25 09:06:09
很多原核生物里面就有这个基因呀，比如大肠杆菌
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5楼2010-12-24 15:06:16
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yzxmichell

金虫 (正式写手)
谢谢楼上的，大肠杆菌如何得到呢？买就可以吗？
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6楼2010-12-24 15:43:13
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rioarsenal

金虫 (正式写手)
yzxmichell(金币+1):谢谢 2010-12-24 15:58:20
引用回帖:
Originally posted by yzxmichell at 2010-12-24 10:11:27:
大家好，初涉分子生物学技术，想请教一下，如何获得Lac-Z基因呢？只知道Lac-Z基因是作为报告基因被人工插入到载体里的，但是想或得一段该基因，该以什么为模板来P呢？是以M13为模板吗？谢谢大家！

这个太容易了，很多质粒上都有啊，设计引物，PCR！
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7楼2010-12-24 15:48:37
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j2

木虫 (正式写手)
yzxmichell(金币+1): 2010-12-27 11:14:22
质粒上的有酶切位点吧
很多菌都含有该基因，可以找个做这个的要株菌啊
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8楼2010-12-24 19:20:58
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ben1147

木虫 (正式写手)
★
dhd997(金币+1):热心鼓励 2010-12-25 09:06:23
yzxmichell(金币+1): 2010-12-26 10:01:52
引用回帖:
Originally posted by yzxmichell at 2010-12-24 15:02:14:
谢谢楼上的，可是我找了几个载体都不行啊，T载体里面的Lac-Z基因都只有100多bp，我需要的是500bp左右的呢，有知道的，麻烦告诉我啊，谢谢啊！！

pBluescript 上的LacZ有576bp（241-816），不知道是不是你要的

pUC19上的lacZ片段也有234bp，也不是一百多啊
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9楼2010-12-24 21:13:25
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