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yzxmichell

金虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】如何获得Lac-Z基因?

大家好,初涉分子生物学技术,想请教一下,如何获得Lac-Z基因呢?只知道Lac-Z基因是作为报告基因被人工插入到载体里的,但是想或得一段该基因,该以什么为模板来P呢?是以M13为模板吗?谢谢大家!
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yzxmichell

金虫 (正式写手)


还想问一下,既然有些质粒里有人工插入的Lac-Z基因,那可不可以我用该基因的引物来P Puc18/19质粒来获得Lac-Z基因呢?在线等,感谢大家!
2楼2010-12-24 10:33:49
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yzxmichell(金币+1):谢谢 2010-12-24 11:12:47
很多商业化的质粒里面就有这个基因,直接设计引物PCR就能得到的。
3楼2010-12-24 11:11:41
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yzxmichell

金虫 (正式写手)


谢谢楼上的,可是我找了几个载体都不行啊,T载体里面的Lac-Z基因都只有100多bp,我需要的是500bp左右的呢,有知道的,麻烦告诉我啊,谢谢啊!!
4楼2010-12-24 15:02:14
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yzxmichell(金币+1):谢谢 2010-12-24 15:42:55
dhd997(金币+1):谢谢交流 2010-12-25 09:06:09
很多原核生物里面就有这个基因呀,比如大肠杆菌
5楼2010-12-24 15:06:16
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yzxmichell

金虫 (正式写手)


谢谢楼上的,大肠杆菌如何得到呢?买就可以吗?
6楼2010-12-24 15:43:13
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rioarsenal

金虫 (正式写手)


yzxmichell(金币+1):谢谢 2010-12-24 15:58:20
引用回帖:
Originally posted by yzxmichell at 2010-12-24 10:11:27:
大家好,初涉分子生物学技术,想请教一下,如何获得Lac-Z基因呢?只知道Lac-Z基因是作为报告基因被人工插入到载体里的,但是想或得一段该基因,该以什么为模板来P呢?是以M13为模板吗?谢谢大家!

这个太容易了,很多质粒上都有啊,设计引物,PCR!
7楼2010-12-24 15:48:37
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j2

木虫 (正式写手)


yzxmichell(金币+1): 2010-12-27 11:14:22
质粒上的有酶切位点吧
很多菌都含有该基因,可以找个做这个的要株菌啊
8楼2010-12-24 19:20:58
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ben1147

木虫 (正式写手)



dhd997(金币+1):热心鼓励 2010-12-25 09:06:23
yzxmichell(金币+1): 2010-12-26 10:01:52
引用回帖:
Originally posted by yzxmichell at 2010-12-24 15:02:14:
谢谢楼上的,可是我找了几个载体都不行啊,T载体里面的Lac-Z基因都只有100多bp,我需要的是500bp左右的呢,有知道的,麻烦告诉我啊,谢谢啊!!

pBluescript 上的LacZ有576bp(241-816),不知道是不是你要的

pUC19上的lacZ片段也有234bp,也不是一百多啊
9楼2010-12-24 21:13:25
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