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lilirong2009

铜虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】细菌生长曲线的绘制

斜面菌株划平板37°,24h活化后挑取单菌落于2ml液体培养基中,200rpm/min 37°过夜(12-18h)培养,得到的菌液作为菌种。取1ml菌种加入到100ml液体培养基中混合均匀,分装到13个试管中,200rpm/min 37°培养,每隔1h取一管之后测定每管的600nm下的吸光值绘制时间与OD值之间的曲线。请问我的接种量为1%,但是有些实验书上是2%或者4%,接种量应该控制在多少?另外摇床的转速应该是多少才正确?应为不同的接种量和转速对OD值都有影响。然后我将每个管子都做了平板计数,但是长出的菌落有两种,一种大的,一种小的,请高手指点一下,谢谢
第一个图是1h的平板计数,第二个图示8h的平板计数,都做了3个平行,但是张的情况都菌落是有大有小。




[ Last edited by lilirong2009 on 2010-12-20 at 20:25 ]
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eagles123

金虫 (正式写手)


lilirong2009(金币+1): 2010-12-21 21:17:30
你那样做好像有点复杂。。。 我们一般是 一个菌落接种到50ml液体培养基,过夜,接种然后100ul到25ml培养基, 然后每隔一段时间测OD 同时做viable count。基本就能保持同步了
7楼2010-12-21 21:06:27
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eagles123

金虫 (正式写手)



silicare(金币+1):谢谢参与 2010-12-22 12:17:36
引用回帖:
Originally posted by lilirong2009 at 2010-12-21 21:19:35:


你们的接种量好少哦,我也有做你说的定期从三角瓶里面取样测定OD值的,可是那样感觉容易污染,我就没那样做。

量还好吧, 普通的菌 一般5个小时能到stationary phase。 至于污染我这样做还从来没被污染过。。 不知道你们实验室有没有过滤通风设备
9楼2010-12-21 22:05:20
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