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阿叉

铜虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】关于HLPC流动相问题

我想先用热乙醇法萃取藻类叶绿素,然后再用高效液相色谱进行分析,可是液相色谱的条件怎么设定了?  
文献中都是用丙酮法萃取叶绿素,然后再用高效液相色谱分析,比如
色谱条件以Pinnacle Ò C18为色谱柱,V(甲醇):V(丙酮)=80:20并加入质量分数为0.11%的冰乙酸为混合流动相,流速为1.10ml/min,检测波长为460nm,控制出峰时间10-30min,用高效液相色谱法进行叶绿素含量的测定。

我的意思就是能不能直接用热乙醇萃取,然后按文献中丙酮萃取后所采取的液相色谱条件,进行色谱分析了,这样到底可行吗?跪求高手,如果不能,能告诉我比较好的色谱条件?

[ Last edited by 1949stone on 2010-12-19 at 12:59 ]
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阿叉

铜虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by Adam_Li at 2010-12-18 17:03:43:
藻类提取的话其实你也可以采取超声破碎的方法,破碎液过滤后可以直接用你说的流动相过HPLC。
如果你你一定要用热乙醇的放法提取的话,建议你在过HPLC之前最好先将乙醇悬蒸掉,一是可以浓缩体积,二是因为乙醇是有 ...

其实我提出来的这个法子就是去两篇文献中的优点,但我怕优点不能兼容啊
9楼2010-12-19 13:08:32
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Adam_Li

铜虫 (初入文坛)


★ ★ ★ ★ ★ ★
rainwander(金币+3):鼓励积极参与~~~ 2010-12-18 17:07:43
看天(金币+3):鼓励回答 2010-12-18 17:07:48
阿叉(金币+1): 2010-12-19 12:29:36
阿叉(金币+1): 2010-12-19 13:07:23
藻类提取的话其实你也可以采取超声破碎的方法,破碎液过滤后可以直接用你说的流动相过HPLC。
如果你你一定要用热乙醇的放法提取的话,建议你在过HPLC之前最好先将乙醇悬蒸掉,一是可以浓缩体积,二是因为乙醇是有机溶剂,如果没有对这个流动相做过测试的话可能回出现意外情况。
既然是做试验当然要做很多尝试,你说的方法如果别人没有做过,你当然要做过了才知道结果嘛。尝试之前你可以先过一针你的纯萃取液,然后再过叶绿素的溶液,这样可以对峰形做一个对比。而且先过热乙醇的话也可以初步判断你这个想法是否可行。
希望对你有所帮助。
我就是做hplc的,不过经验不是很多,而且我做的是表达蛋白的,和你做的流动相差别很大。
2楼2010-12-18 17:03:43
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)



rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2010-12-19 11:08:02
引用回帖:
Originally posted by 阿叉 at 2010-12-18 16:28:12:
我想先用热乙醇法萃取藻类叶绿素,然后再用高效液相色谱进行分析,可是液相色谱的条件怎么设定了?  
文献中都是用丙酮法萃取叶绿素,然后再用高效液相色谱分析,比如
色谱条件以Pinnacle Ò C18为色 ...

可以的,样品怎么来的不影响后面的分析方法的,你可以按照自己的方法提取,然后按照别人的方法分析的。
3楼2010-12-19 09:46:39
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阿叉

铜虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by Adam_Li at 2010-12-18 17:03:43:
藻类提取的话其实你也可以采取超声破碎的方法,破碎液过滤后可以直接用你说的流动相过HPLC。
如果你你一定要用热乙醇的放法提取的话,建议你在过HPLC之前最好先将乙醇悬蒸掉,一是可以浓缩体积,二是因为乙醇是有 ...

你和楼上的讲的不一样啊
4楼2010-12-19 12:43:52
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