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阿叉

铜虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】关于HLPC流动相问题

我想先用热乙醇法萃取藻类叶绿素，然后再用高效液相色谱进行分析，可是液相色谱的条件怎么设定了？
文献中都是用丙酮法萃取叶绿素，然后再用高效液相色谱分析，比如
色谱条件以Pinnacle Ò C18为色谱柱，V(甲醇)：V(丙酮)=80:20并加入质量分数为0.11%的冰乙酸为混合流动相，流速为1.10ml/min，检测波长为460nm，控制出峰时间10-30min，用高效液相色谱法进行叶绿素含量的测定。

我的意思就是能不能直接用热乙醇萃取，然后按文献中丙酮萃取后所采取的液相色谱条件，进行色谱分析了，这样到底可行吗？跪求高手，如果不能，能告诉我比较好的色谱条件？

[ Last edited by 1949stone on 2010-12-19 at 12:59 ]

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1楼 2010-12-18 16:28:12

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yangjun130

铜虫 (小有名气)

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★ ★
dhd997(金币+2):good 2010-12-19 13:33:30
阿叉(金币+1): 2010-12-19 16:56:04

你萃取的时候可以使用乙醇进行萃取，我想请问下你有没有标准叶绿素的样品，如果有的话可以用乙醇溶解叶绿素后做几个标样，采用你看文献上说的流动相进行洗脱，看看图谱中有没有乙醇的峰出现。其实不管有没有乙醇的峰出现，都不会影响你后面的测定。
然后你在将你乙醇萃取的样品稀释到适宜倍数，然后进样，对比标样图谱就可以了。

你这里只是因为你的萃取液和流动相恰好都还有丙酮而已，这个是巧合。他的意思并不是说你拿什么溶剂萃取就得加这个溶剂作为流动相，明白没有

引用回帖:

Originally posted by 阿叉 at 2010-12-18 16:28:12:
我想先用热乙醇法萃取藻类叶绿素，然后再用高效液相色谱进行分析，可是液相色谱的条件怎么设定了？
文献中都是用丙酮法萃取叶绿素，然后再用高效液相色谱分析，比如
色谱条件以Pinnacle Ò C18为色 ...