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wwdxx2004

金虫 (正式写手)

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[交流] 【求助/交流】反敲除

请问FRT位点都是一样的吗？我对我敲除后的菌进行测序发现FRT位点处有一个突变会不会对反敲除有影响呐谢谢

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1楼 2010-12-16 20:27:46

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最爱花诗雨

金虫 (正式写手)

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★ ★ ★
wwdxx2004(金币+1): 2010-12-17 20:57:23
scelab(金币+3):谢谢交流！:tiger06: 2010-12-17 23:15:56

1楼说的有可能，测序出来结果误差的可能性还是很大的，因为对于Flp/FRT系统，具有良好的稳定性，你的“反敲除”只是一个pCP20的转化热击表达消除抗性基因片段的过程，不麻烦的，如果真的是FRT位点的一个突变，即使抗性基因消除以后，FRT还是会留在序列上，对后期的发酵有没有影响还是不好说的。呵呵~~希望是测序的问题