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yuhai4444木虫 (正式写手)
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【求助/交流】固氮菌的固氮能力测定一般是用什么方法啊？ 已有14人参与
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最近试验遇到困难了，筛选出来的固氮菌，消煮后用凯式定氮仪测，却没有固氮力，不知道怎么办，我看文献上很多用的是乙炔还原法，很少用凯式定氮仪来侧固氮菌的固氮能力，不知是方法不太好，还是本来筛出来的，就没有固氮力，这一步没有做好，接下来的工作都没有办法做了，郁闷中啊，请大家帮忙分析分析。 |
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将菌先培养在血清小瓶中，在28～30℃下培养24h～48 h后，将血清小瓶盖在无菌条件下换成橡胶塞，用无菌注射器抽出10%的气体，然后给每瓶注入2mLC2H2，再置培养箱中培养24h～48 h。从各培养瓶中取气样10μL，注入气相色谱仪(GC)中，测C2H2，C2H4的生成情况。从气相色谱仪显示屏的C2H4 峰值判断有无C2H4的产生， 以接种但未注入C2H2的试管作为对照。按下列公式计算固氮酶活性： N=(hx×C×V)/(hs×常数×t) 式中，hx 为样品峰值，hs 为标准C2H4 峰值，C 为标准C2H4 浓度(nmol•mlL−1)， V 为试管体积(mL)， 常数为标准C2H4 在测试时的体积(mL)，t 为样品培养时间(h)， N 为产生的C2H4 浓度[即固氮酶活性， nmol(C2H4)•h−1•mL−1]。 |
9楼2012-05-21 10:31:50
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