版块导航: 正在加载中...

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告

返回列表

baby1_9253344

金虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 3872.7
帖子: 287
在线: 519小时
虫号: 535686

[交流] 【求助/交流】生物菜鸟求助基础问题：如何判断质粒是表达质粒还是克隆质粒？

如题，最近发email向老外索要了一个质粒，pET29a-SmtA，查了一下这个质粒的来源，是在pET29a中插入了SmtA基因片段（可以表达ＭＴ蛋白）之后的质粒~
可是质粒拿到手之后不知道如何使用啊~不知道这个质粒能否直接转化到大肠杆菌中之后，能不能让大肠杆菌合成出ＭＴ蛋白呢？　我是学化学的，表达不专业，各位见谅，见谅～
我的疑问有一下几方面：
1，可以从质粒名称知道这质粒是表达载体还是克隆载体吗？表达载体就是转化进宿主细胞之后就能表达出来该基因的吗？
2，如果单看质粒名字看不出来，如何鉴别之？
多谢各位啦~

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

新手求助——质粒电泳条带问题已经有15人回复
求助啊！转质粒出现问题了！已经有13人回复
【求助/交流】酵母PRS整合表达质粒使用的问题，我需要你的帮助，谢谢已经有7人回复
【求助/交流】枯草-大肠穿梭质粒pHY300PLK是克隆载体还是表达载体？已经有3人回复
【求助/交流】质粒测序测不到克隆位点已经有16人回复
【求助/交流】构建表达质粒已经有12人回复
【求助/交流】有哪位高手指点表达质粒的构建已经有7人回复
【求助/交流】关于PEt-28a质粒载体表达蛋白质的问题已经有9人回复
【求助/交流】怎么判断质粒的大小已经有3人回复
【求助/交流】关于质粒构建与表达的问题已经有14人回复

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2010-12-02 21:10:54

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

ben1147

木虫 (正式写手)

应助: 18 (小学生)
贵宾: 0.003
金币: 5847.6
帖子: 952
在线: 116.9小时
虫号: 709538

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
baby1_9253344(金币+2):谢谢帮助~灰常详尽啊~ 2010-12-03 08:43:55

引用回帖:

Originally posted by baby1_9253344 at 2010-12-02 21:10:54:
如题，最近发email向老外索要了一个质粒，pET29a-SmtA，查了一下这个质粒的来源，是在pET29a中插入了SmtA基因片段（可以表达ＭＴ蛋白）之后的质粒~
可是质粒拿到手之后不知道如何使用啊~不知道这个质粒能否直接转 ...

看插入位点上游的启动子是什么，有没有操纵子结构等等
像这个是pET系列的衍生质粒，那肯定是表达质粒了，要转化进表达用菌的感受态。如果要来的质粒很少的话，最好先转克隆菌，多提一点质粒以备以后用。

因为pET29表达用的是T7启动子，所以宿主菌要是T7噬菌体的溶源菌（最普通最常见的就是BL21(DE3)，感受态很容易买到）。调控元件是lac操纵子，所以要用IPTG诱导表达。

网上搜一下“pET表达手册”，应该对你很有帮助。另外去Novagen网站上找pET29的图谱信息，产品代码TB076。
找不到的话站内我你的邮箱，我可以发给你。

赞一下(1人)