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木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】我的蛋白哪去了?焦虑啊!已有9人参与

各位大侠,能否帮我分析一下,我昨天刚刚提取的蛋白,当时就加buffer煮沸5min,然后跑电泳,考马斯亮蓝染色,效果很好,蛋白条带很清晰,今天想转膜,所以每个样品都拿出来煮了4min,跑两个泳道,一个做考马斯亮蓝染色,另一个转膜(其余操作和昨天一样)。但是结果不如人意,和前面的一样,做考马斯亮蓝染色后,除了marker以外,没有其他条带,转膜的结果也是这样,不知道我的蛋白哪去了?大家能否帮我分析一下原因。非常感谢。
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lsbrc

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
加了SDS,再冻起来了,一般不会这么容易就降解了。
是不是,你没有完全解冻,SDS一定要完全解冻才行的?
9楼2010-12-06 09:20:16
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kkunny

铜虫 (著名写手)

不是分解了吧
好好学习,天天向上
2楼2010-12-01 14:47:44
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350784478

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by jurkat.1640 at 2010-12-01 16:23:41:
buffer?

buffer没有问题,因为我是先煮了,再冻起来的,当时跑的效果很不错,只是隔天再跑,完全不能看。
朝为田舍郎,暮登天子堂。将相本无种,男儿当自强。
5楼2010-12-02 19:02:07
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350784478

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by xuqingchun33 at 2010-12-01 14:53:57:
加PMSF了没

加了,在加裂解液的时候,就加了PMSF。
朝为田舍郎,暮登天子堂。将相本无种,男儿当自强。
6楼2010-12-02 19:02:47
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