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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】我的蛋白哪去了？焦虑啊！
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木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】我的蛋白哪去了？焦虑啊！ 已有9人参与

各位大侠，能否帮我分析一下，我昨天刚刚提取的蛋白，当时就加buffer煮沸5min,然后跑电泳,考马斯亮蓝染色，效果很好,蛋白条带很清晰，今天想转膜，所以每个样品都拿出来煮了4min，跑两个泳道，一个做考马斯亮蓝染色，另一个转膜（其余操作和昨天一样）。但是结果不如人意，和前面的一样，做考马斯亮蓝染色后，除了marker以外，没有其他条带，转膜的结果也是这样，不知道我的蛋白哪去了？大家能否帮我分析一下原因。非常感谢。
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朝为田舍郎，暮登天子堂。将相本无种，男儿当自强。
1楼 2010-12-01 14:30:15
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lsbrc

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
加了SDS，再冻起来了，一般不会这么容易就降解了。
是不是，你没有完全解冻，SDS一定要完全解冻才行的？
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9楼2010-12-06 09:20:16
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kkunny

铜虫 (著名写手)
不是分解了吧
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好好学习，天天向上
2楼2010-12-01 14:47:44
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350784478

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by jurkat.1640 at 2010-12-01 16:23:41:
buffer？

buffer没有问题，因为我是先煮了，再冻起来的，当时跑的效果很不错，只是隔天再跑，完全不能看。
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朝为田舍郎，暮登天子堂。将相本无种，男儿当自强。
5楼2010-12-02 19:02:07
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350784478

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by xuqingchun33 at 2010-12-01 14:53:57:
加PMSF了没

加了，在加裂解液的时候，就加了PMSF。
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朝为田舍郎，暮登天子堂。将相本无种，男儿当自强。
6楼2010-12-02 19:02:47
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