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侯云hy

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】这退火温度怎么算啊 已有5人参与

各位高手:我设计的引物,上游加了GC夹子,公司给的TM值是86度,下游引物没有夹子。退火温度为53度。这退火温度怎么算啊?谢谢指教
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侯云hy

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2010-11-28 22:38:05:
我们的计算方法 Tm1+Tm2/2 ---5 的值就是理论上的退火温度,但是实际上要在这个值上下浮动几度设定一个pcr温度梯度,摸一下温度,然后再大批量进行扩增!

是(tm1+tm2)/2--5么?
9楼2010-11-29 16:27:56
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

按较低的那个算~~
2楼2010-11-28 11:44:37
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yinsongna

金虫 (正式写手)

跑个梯度
3楼2010-11-28 12:36:00
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侯云hy

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by yinsongna at 2010-11-28 12:36:00:
跑个梯度

具体跑那个温度的梯度啊?我跑了63-53的 什么都没有 有引物二聚体,但不是很亮。
4楼2010-11-28 12:56:31
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