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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】这退火温度怎么算啊
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侯云hy

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】这退火温度怎么算啊已有5人参与

各位高手：我设计的引物，上游加了GC夹子，公司给的TM值是86度，下游引物没有夹子。退火温度为53度。这退火温度怎么算啊？谢谢指教
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1楼2010-11-28 11:11:51
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我们的计算方法 Tm1+Tm2/2 ---5 的值就是理论上的退火温度，但是实际上要在这个值上下浮动几度设定一个pcr温度梯度，摸一下温度，然后再大批量进行扩增！
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
8楼2010-11-28 22:38:05
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
按较低的那个算~~
赞一下 回复此楼
2楼2010-11-28 11:44:37
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yinsongna

金虫 (正式写手)
跑个梯度
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3楼2010-11-28 12:36:00
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侯云hy

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yinsongna at 2010-11-28 12:36:00:
跑个梯度

具体跑那个温度的梯度啊？我跑了63-53的 什么都没有 有引物二聚体，但不是很亮。
赞一下 回复此楼
4楼2010-11-28 12:56:31
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