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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于昆虫细胞Sf9的一些问题！大虾请进！
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heartear1

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于昆虫细胞Sf9的一些问题！大虾请进！ 已有8人参与

开题了，需要用到Sf9。

以下问题希望大虾能予以解答　　希望本贴能帮助到一些人

1。今天了解到Sf9可以在Sf900II培养基中悬浮培养。就本实验室的条件，转瓶和发酵罐等想都不想了，剩下就是放在三角瓶里在摇床中培养。搜到一篇文章《不同时期Sf9细胞琥珀酸脱氢酶活的研究》，介绍摇床条件27℃，80r/min，接种浓度为
1.5×10^5个/ml。现在不知道应该向三角瓶中添加多少培养基，也就是说，培养基体积应该占三角瓶容积的几分之几，才能使细胞长得最好（如，培养酵母使，培养基占三角瓶容积的1/5等等）。

2。课题需要做一种药物在不同pH下对Sf9的作用，pH 6.5~7.5，有文章表明Sf9在pH=7.0 时生长就很不好了，但我还是希望能多了解一些Sf9对碱性的耐受性，希望了解的大牛大虾能帮帮我，否则我只能换试验材料了。

3。Sf900II培养基是无血清培养基？使用时需要灭菌吗？能用高温高压灭菌吗？

[ Last edited by heartear1 on 2010-11-25 at 16:31 ]
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资源昆虫
1楼 2010-11-25 16:25:44
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小乖小帅

铁虫 (小有名气)

昆虫细胞

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+3):谢谢交流！:tiger06: 2010-12-01 23:15:34
用Grase培养基，可以是贴壁生长，不用胰酶消化直接吹就能吹下来，PH:6.0-6.4
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3楼2010-12-01 22:42:21
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rainbow1128

银虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流 2010-12-10 09:11:46
1.sf9悬浮培养，体积要求占瓶子体积的10-20%,如果你用500ml的瓶子的体积，培养基占50-100ml.我们培养最低密度是0.6*10^6个/ml。
2.sf900-II液体培养基本来就是无菌的可以直接使用。
3.sf9最适宜的PH值是6.2-6.3，不在这个范围对细胞影响很大。
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4楼2010-12-09 17:30:16
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普通回帖

heartear1

银虫 (小有名气)
没人
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资源昆虫
2楼2010-11-26 09:44:55
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heartear1

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by rainbow1128 at 2010-12-09 17:30:16:
1.sf9悬浮培养，体积要求占瓶子体积的10-20%,如果你用500ml的瓶子的体积，培养基占50-100ml.我们培养最低密度是0.6*10^6个/ml。
2.sf900-II液体培养基本来就是无菌的可以直接使用。
3.sf9最适宜的PH值是6.2-6.3 ...

非常感谢！
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资源昆虫
5楼2010-12-09 18:29:24
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jlspxhw
6楼2010-12-10 07:56:37
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pidou213

木虫 (正式写手)
★
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引用回帖:
Originally posted by rainbow1128 at 2010-12-09 17:30:16:
1.sf9悬浮培养，体积要求占瓶子体积的10-20%,如果你用500ml的瓶子的体积，培养基占50-100ml.我们培养最低密度是0.6*10^6个/ml。
2.sf900-II液体培养基本来就是无菌的可以直接使用。
3.sf9最适宜的PH值是6.2-6.3 ...

培养最低密度 是什么意思？
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见得多爱的多
7楼2011-01-18 22:50:34
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rainbow1128

银虫 (初入文坛)
★ ★
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dhd997(金币+1): good 2011-01-20 09:17:55
引用回帖:
Originally posted by pidou213 at 2011-01-18 22:50:34:



培养最低密度 是什么意思？

你可以稀释的最低浓度：0.6*10^6个/ml，低于这个密度细胞很难培养起来。
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8楼2011-01-20 09:10:17
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pidou213

木虫 (正式写手)
★
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引用回帖:
Originally posted by rainbow1128 at 2011-01-20 09:10:17:

你可以稀释的最低浓度：0.6*10^6个/ml，低于这个密度细胞很难培养起来。

细胞培养对初始浓度也有很大的要求吗？
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见得多爱的多
9楼2011-01-20 09:13:47
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pidou213

木虫 (正式写手)
★
dhd997(金币+1): 这个比较困难。我试过。 2011-01-20 09:18:27
引用回帖:
Originally posted by rainbow1128 at 2011-01-20 09:10:17:

你可以稀释的最低浓度：0.6*10^6个/ml，低于这个密度细胞很难培养起来。

我以前以为一个培养基内，只要有一个细胞，理论上就可以生长起来的呢
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见得多爱的多
10楼2011-01-20 09:14:39
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