| 查看: 713 | 回复: 1 | |||
beisimai895木虫 (小有名气)
|
[交流]
【求助/交流】枯草芽孢杆菌感受态细胞制作方法 已有1人参与
|
| 想做一批枯草芽孢杆菌的感受态细胞，之后用于电转的，各位有什么好的方法吗，给我看看。 |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有183人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 枯草芽孢杆菌基因组提取！
已经有11人回复
- 怎样从土壤中提取枯草芽孢杆菌，并进行纯化？越详细越好！
已经有5人回复
- 跪求专家指导，枯草芽孢杆菌固体浅盘发酵时，怎样促使芽孢生成？
已经有9人回复
- 枯草芽孢杆菌转化假阳性
已经有8人回复
- 枯草芽孢杆菌胞内代谢产物怎么提取呀？
已经有4人回复
- 转化长不出来菌
已经有13人回复
- 如何杀死枯草芽孢杆菌，而得到没有菌的发酵产物？谢谢
已经有11人回复
- 枯草芽孢杆菌在种子培养基中的生长问题
已经有20人回复
- 关于枯草芽孢杆菌计数以及生长曲线的制作问题
已经有23人回复
- 枯草芽孢杆菌生长曲线
已经有6人回复
- 枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌区别
已经有11人回复
- 枯草芽孢杆菌孢子在无机buffer里可以萌发吗？
已经有8人回复
- 关于枯草芽孢杆菌转化的问题~
已经有7人回复
- 枯草芽孢杆菌中试的时候PH上升过快，数量过低？
已经有25人回复
- 革兰氏阳性菌感受态的制备及转化
已经有14人回复
- 枯草芽孢杆菌表达的问题
已经有8人回复
- 枯草芽孢杆菌涂布平板不生长怎么回事？
已经有16人回复
- 【求助/交流】枯草芽孢杆菌在40倍显微镜下观察为什么有好多球状的东西？
已经有18人回复
- 求助枯草芽孢杆菌生长形态的问题
已经有7人回复
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
实验试剂： GM：LB+0.5M山梨醇 ETM：0.5M山梨醇，0.5M甘露醇，10%甘油 RM：LB+0.5M山梨醇+0.38甘露醇 方法： 1）新鲜平板挑单菌落（小一点为好）接种于5ml LB培养基中，过夜培养。 2）测量摇管内OD，控制好接种量，使接种完毕后培养基（50ml GM）的OD在0.19-0.2之间。37℃，200rpm培养至OD600=1.0（大约3-4小时）左右。 3）取全部菌液冰水浴10 min，然后5000rpm，8min，4℃离心收集菌体。 4）用40ml预冷的电转缓冲液ETM洗涤菌体，5000rpm，8min，4℃离心去上清，如此漂洗3次。 5）将洗涤后的菌体重悬于等500μl的ETM中，每管分装60μl。 6）将60μl感受态细胞中加入1-6 μl质粒，冰浴孵育5min，加入预冷的电转杯（1mm）中，电击一次。电转仪设置：2.0kv（另外我还尝试过0.8kv，1.2kv），25μF，200Ω，1mm，电击1次。（持续时间4.5ms-5ms之间） 7）电击完毕立即加入1ml 复苏培养基RM，37℃，200rpm，复苏3h后，涂板。37℃，过夜培养。 |
2楼2014-02-11 13:43:24
