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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请教各位大侠关于DNA杂交的一些问题
汕头大学海洋科学接受调剂
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hubaolei

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】请教各位大侠关于DNA杂交的一些问题

请问寡聚核苷酸的最适杂交温度应该低于Tm值多少才比较合适呢?网上有的说是Tm-    25,有的说是Tm-5.

       溶液均相杂交和固相界面杂交温度有区别吗?

比如我的DNA序列为5'-GTA TGT ATG CGA TAC TTG CAT ACG TGC TAC-3'
              互补序列为5'-GTA GCA CGT ATG CAA GTA TCG CAT ACA TAC-3'
              链浓度为10nM, NaCl 1M, 不含MgCl2
              此时的杂交温度是多少呢?

麻烦各位大侠帮帮忙了!
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1楼 2010-10-31 11:42:51
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hubaolei

铜虫 (初入文坛)
好心人帮帮忙吧~
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2楼2010-11-01 10:56:38
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪
这种的谁也给不了你标准答案
标准答案在你自己手里。
预实验吧
做个梯度时间优化条件
好实验条件都是一个一个的优化出来的
赞一下 回复此楼
青春的岁月，我们身不由己，只因这胸中燃烧的梦想！
3楼2010-11-01 16:02:54
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oezp

金虫 (正式写手)
我们做液相杂交的 时候是相差10度左右了
赞一下 回复此楼
为了美好的将来而奋斗。。。醒悟
4楼2010-11-01 16:32:48
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real-gold

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
Originally posted by oezp at 2010-11-01 16:32:48:
我们做液相杂交的 时候是相差10度左右了

你好，请问做液相杂交时所用的杂交缓冲液是什么？谢谢
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2011-06-29 16:51:14
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