应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】测序
181/2返回列表12下一页
查看: 2015  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

飘在海上的雪

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】测序 已有11人参与

我做的是RNA反转录后的PCR产物测序，正向测序，反向测序什么差异，得到的序列是正向还是反向？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
不在沉默中爆发，就在沉默着死亡！
1楼 2010-10-26 20:00:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

amilie030312

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):鼓励交流。 2010-10-27 10:02:29
你的目的片段有多长呢？
一般单向测序只能保证600的精准性，有得承诺保证800但我觉得可靠性不高，去掉头上的引物部分所以没多长的，所以双向测序是两个方向测然后把序列转换好了之后再进行对比，全部一样的部分的准确性最好最可信，其余的部分我认为都不能相信的。另外还有一些送的PCR产物的或者回收产物的，可能存在大于600bp的情况，那就只能双向测序后再拼接到一起了。
赞一下(3人) 回复此楼
10楼2010-10-27 09:36:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

mazhenning

新虫 (初入文坛)
双向测序可以提高测序的准确度。厂家应该给你的是双向的两个序列。
赞一下 回复此楼
2楼2010-10-26 20:41:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘在海上的雪

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by mazhenning at 2010-10-26 20:41:26:
双向测序可以提高测序的准确度。厂家应该给你的是双向的两个序列。

但是我测两段产物，正反两向只有96%，99%相似，是什么原因呢？

[ Last edited by 飘在海上的雪 on 2010-10-26 at 20:51 ]
赞一下 回复此楼
不在沉默中爆发，就在沉默着死亡！
3楼2010-10-26 20:46:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mazhenning

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 飘在海上的雪 at 2010-10-26 20:46:06:

但是正反两向只有96%相似，是什么原因呢？

是中间序列不匹配，还是两端的？
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-10-26 20:48:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ben1147

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
楼主把载体序列去掉了么？
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2010-10-26 21:35:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

union_david

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-10-27 07:03:58
双向测通准确率高一些，而且可以互相验证。你正向、反向测序也应该是与目的序列比对的，而且两端碱基序列由于测序技术上的原因时不能避免出现错误的。
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2010-10-26 22:19:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘在海上的雪

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by mazhenning at 2010-10-26 20:48:29:

是中间序列不匹配，还是两端的？

两端和中间都有。
回复此楼
不在沉默中爆发，就在沉默着死亡！
7楼2010-10-26 23:12:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tigertang

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这很正常，正反测序列不一致，必须检查测序的峰图，确定哪一个更准确，如有需要，可以传给我
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2010-10-26 23:51:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘在海上的雪

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by ben1147 at 2010-10-26 21:35:45:
楼主把载体序列去掉了么？

我测的是PCR产物
赞一下 回复此楼
不在沉默中爆发，就在沉默着死亡！
9楼2010-10-27 08:14:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 飘在海上的雪 的主题更新
181/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] FileCode能看出啥？ +10 要乐观耀哥 2026-08-10 28/1400 2026-08-13 17:51 by 医学老男孩
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 36/1800 2026-08-12 22:50 by sdfapple719
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[论文投稿] 职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭