应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】启动子缺失载体的构建
71/1返回列表
查看: 2106  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

暗星

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】启动子缺失载体的构建 已有5人参与

最近构建了启动子的缺失载体，但是转烟草之后GUS染色一直没有染出来，请教各位高手指点一下！
注：后来分析序列时，得知在GUS起始密码子上有还有一个ATG（启动子上的），但是并没有造成GUS的移码突变，只是可能会在GUS蛋白前面添加44个氨基酸，难道这样会造成染色失败吗？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-10-24 10:08:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小林mxm

木虫 (正式写手)

刚健
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我也想请教，哪位高人给指点指点啊！
赞一下(1人) 回复此楼
君子之道，譬如行远，必自迩：譬如登高，必自卑！
2楼2010-10-24 10:35:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虫子火箭兵

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2):幸苦！ 2010-10-24 14:17:17
1、你确定得到了转基因植株吗？最好用GUS基因座探针做southern blot验证一下
2、 GUS staining 过程是否正确
3、 没有强启动子，可能导致GUS表达不强
赞一下(3人) 回复此楼
3楼2010-10-24 10:59:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ben1147

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2):good！ 2010-10-24 14:17:28
GUS活性比较强的，一般融合蛋白对GUS部分的空间结构影响不大，也会有活性

而且仅仅有个ATG是不足以导致表达的。ATG只是翻译的起点，ATG之前没有起始转录必须的元件的话是不能引发转录的。mRNA都没有，哪来蛋白？得看ATG之前序列是什么才好分析
赞一下(3人) 回复此楼
4楼2010-10-24 13:58:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虫子火箭兵

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by ben1147 at 2010-10-24 13:58:19:
GUS活性比较强的，一般融合蛋白对GUS部分的空间结构影响不大，也会有活性

而且仅仅有个ATG是不足以导致表达的。ATG只是翻译的起点，ATG之前没有起始转录必须的元件的话是不能引发转录的。mRNA都没有，哪来蛋白 ...

正解，学习了
回复此楼
5楼2010-10-24 19:15:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxf8470

木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-25 08:17:44
可能是载体出问题了。找一个可以做阳性对照的转基因烟草，排除染色是否有问题。
重新构建载体，把启动子上的ATG去掉。看能否同时转烟草和拟南芥。
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2010-10-25 02:26:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18201723019

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
怎么做启动子缺失 ,分析预测了可能存在的顺式作用元件，可是确定不下来怎么做缺失，从哪里做，需要考虑哪些方面
赞一下 回复此楼
7楼2019-09-23 16:18:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 暗星 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] (出分啦!!!)26 考研调剂 20w+调剂信息火速更新中！【捡漏】qq 群：1087823172 +3 db58 2026-02-28 79/3950 2026-02-28 17:50 by nbf68
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +4 吃宵夜1 2026-02-28 6/300 2026-02-28 17:38 by 吃宵夜1
[考研] 311求调剂 +6 南迦720 2026-02-28 6/300 2026-02-28 17:17 by 刘茉莉
[考研] 高分子化学与物理调剂 +3 好好好1233 2026-02-28 4/200 2026-02-28 17:13 by sandychj
[考研] 化工专硕348，一志愿985求调剂 +3 弗格个 2026-02-28 5/250 2026-02-28 17:04 by sandychj
[考博] 博士自荐 +3 kkluvs 2026-02-28 3/150 2026-02-28 16:59 by StarAura
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
[考博] 博士推荐 +4 花儿笑? 2026-02-21 5/250 2026-02-28 16:55 by mumin1990
[考研] 285求调剂 +3 满头大汗的学生 2026-02-28 3/150 2026-02-28 16:22 by 无际的草原
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +4 礼堂丁真258 2026-02-28 6/300 2026-02-28 16:18 by 求调剂zz
[考研] 材料类求调剂 +3 wana_kiko 2026-02-28 3/150 2026-02-28 15:03 by lature00
[考研] 295求调剂 +4 19171856320 2026-02-28 4/200 2026-02-28 13:39 by ms629
[考研] 0856调剂 +3 刘梦微 2026-02-28 3/150 2026-02-28 13:22 by houyaoxu
[考研] 304求调剂 +5 曼殊2266 2026-02-28 6/300 2026-02-28 12:44 by 迷糊CCPs
[硕博家园] 博士自荐 +6 科研狗111 2026-02-26 9/450 2026-02-28 12:32 by seaskyy
[考研] 272求调剂 +3 田智友 2026-02-28 3/150 2026-02-28 12:31 by 王加浩to
[考研] 298求调剂 +4 axyz3 2026-02-28 4/200 2026-02-28 11:21 by wang_dand
[基金申请] 什么是人一生最重要的？ +10 瞬息宇宙 2026-02-21 10/500 2026-02-27 08:46 by tfang
[教师之家] 版面费该交吗 +14 苹果在哪里 2026-02-22 17/850 2026-02-26 11:55 by AGI智创机器人
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭