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【求助/交流】为什么镍柱纯化可溶性蛋白，电泳结果总是显示不纯呢？已有8人参与
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3月份做过一次，在200mM咪唑和500mM咪唑洗脱组分中都有很纯的目的蛋白。最近做的时候，总是有杂蛋白。用平衡液洗杂蛋白的体积和时间是差不多的。不知道为什么就是不纯？ 蛋白是重组菌落经IPTG大量诱导表达得到。在优化后的条件下表达。（适于可溶性目的蛋白表达）。 还有，我这周在纯化时所用的所有液体都保持在4度左右，这会不会对过柱有影响呢？  |
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foryever
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