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04swlcm
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[交流]
【求助/交流】定点突变-DpnI消化已有8人参与
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大家好： 我最近做定点突变，采用反向PCR方法扩整个质粒+基因片段（突变位点设计在两互补的突变引物中间），高保真酶跑20个循环，直接在20uLPCR产物中加入1uLDpnI消化3h，取10uL转化JM109，涂Amp平板，一颗菌未长，郁闷中，请大家帮忙！这种突变方法需要注意些什么呢？ 请问DpnI消化前或后需要纯化吗？我没有，好些资料上也说不需要纯化。 |
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