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【求助/交流】热不对称PCR的问题,回帖就送金币!!多谢帮忙回答的,帮顶的!!
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专业: 流行病学方法与卫生统计
[交流]
【求助/交流】热不对称PCR的问题,回帖就送金币!!多谢帮忙回答的,帮顶的!!
已有12人参与
首先,热不对称PCR的好处是什么?它主要用来扩已知序列的旁侧基因,然后通过
一步步提高退火温度,最后达到P出一条带的目的。这样理解对吗?
其次,我现在做启动子的染色体步移,加了接头后。试剂盒也是推荐用热不对称PCR。但这时我知道我的接头序列,又知道我的已知序列,完全可以用普通PCR扩嘛。这样想对吗?
还有,不太理解接头引物AP和特异性引物GSP之间在片段长度和退火上的差异。试剂盒上的:AP1:22个碱基 51度退火 AP2:19, 57度 。而建议我的GSP:25~28个碱基, 退火和GC和AP差不多。为什么碱基数差那么多?
最后,2步法PCR(94度,64度)和3步法(94,退火,72度)有什么区别?好处是?
大家一起来讨论下这四个问题吧!!多谢了~~~谢谢!!!!
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1楼
2010-10-17 16:53:38
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天龙n部
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专业: 微生物生理与生物化学
★
adslye(金币
+1
):谢谢参与
额,热不对称PCR我师姐做过,这个期待答案
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9楼
2010-10-17 21:33:29
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taigongzaici
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专业: 水产生物遗传育种学
★
adslye(金币
+1
):谢谢参与
学习,期待大侠出现,顺便领金币,呵呵
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2楼
2010-10-17 18:56:14
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lilei8610
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专业: 能源化工
★
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+1
):谢谢参与
帮你顶一下,专业不一样,没法帮你,呵呵
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以马内利!
7楼
2010-10-17 19:47:22
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lhwei1987
铁杆木虫
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专业: 微生物学
★
adslye(金币
+1
):谢谢参与
帮顶,期待答案~~
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8楼
2010-10-17 21:30:12
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