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【求助/交流】流式 细胞数量问题 已有2人参与
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今天第一次做流式，是拿到其它分院实验室做的 三管情况是这样的： 第一管，实验组细胞（长期药物处理的细胞），未加抗体（这是某个老师让做的，防止细胞自发荧光） 第二管，对照组（未处理的细胞），加荧光标记的抗体 第三管，实验组（长期药物处理的细胞），加荧光标记的抗体 目的是检测第二管和第三管细胞两者表面蛋白的表达差异。 问题是这样：第三管细胞数量偏少，10分钟时间还没有统计到1000个细胞，人家就不让做了。说是必须到1万个细胞，我提出统计一下荧光值，拿第三组1000细胞和二组10000个细胞比较一下，如果三大于二，一样可以反应问题，可人家说没有统计学意义，让重新做。 其实我离心时就发现第三管细胞数量少于第二管，计数有误差，但主要问题还是离心把细胞丢失的，因为第一管没有离心，细胞数量是没有问题的。 明天再做我该注意什么呢？细胞数量再增加是对的吧，荧光抗体量也多加一点。 |
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